Señalización mediada por AMPc en Trypanosoma cruzi

MC CORMACK, B; JAGER, AV; DE GAUDENZI, JG; MILD, JG; MUSIKANT, D; PANTANO, S; ALTSCHULER, DL; EDREIRA, M

Congreso; XXVI Reunión Anual SAP 2013; 2013

El AMPc ha sido implicado como mensajero secundario en una gran variedad de procesos biológicos. En células eucariotas superiores, las vías de señalización dependientes de AMPc y sus efectores(PKA y Epac), han sido ampliamente estudiados. En cambio, si bien se ha demostradoque el AMPccumple un papel importante en la modulación del ciclo de vida de T. cruzi,y en particular un rol negativo sobre la proliferación,poco se conoce acerca de losmecanismos de acción del nucleótido en el parásito. Contrariamente a lo esperado, la inhibiciónde TcPKA(proteína quinasa A, único efector conocido en T. cruzi), en lugar de inhibir la proliferacióne inducir la diferenciación,conduce a la muerte celular en epimastigotes. Este resultado sugiere fuertemente la existencia deefectores del AMPc independientes de PKA. Sin embargo, el genoma de T. cruzino presenta secuencias correspondientes a Epac. Con el objetivo de identificar nuevos efectores del AMPc en T. cruzi, realizamos una búsqueda in silico que nos permitió identificar 27 proteínas con potenciales dominios de unión a AMPc. Para analizar la topología de los dominios de unión a AMPc de los dos candidatos mas fuertes, se generaronmodeloscomparativos usandola estructura de PKA-Ria unido a AMPc (el homólogode mamífero más cercano)como molde. Ensayos de desplazamiento utilizando una resina unida covalentemente a AMPc nos permitió confirmar experimentalmente la capacidad de los candidatos seleccionados de reconocer y unir AMPc, abriendo la posibilidad de que los mismos sean nuevos efectores del AMPc que participen en vías de señalización independientes de PKA.