MECANISMOS DE DEFENSA EN CINCO ESTADIOS DEL DESARROLLO EMBRIONARIO DE Rhinella (Bufo) arenarum FRENTE AL ESTRÉS OXIDATIVO AGUDO INDUCIDO POR NÍQUEL

SZTRUM AA; ARONZON CM; SABATINI SE; HERKOVITS J; RÍOS DE MOLINA MC

Mar del Plata, Buenos Aires, Argentina

Congreso; II Congreso de la Sociedad de Toxicología y Química Ambietal (SETAC) (IV Reunión SETAC en Argentina): Avances en Toxicología y Química Ambiental; 2008

SETAC ARGENTINA

La contaminación de los ambientes acuáticos es una de las causas de la declinación, a escala mundial, de muchas poblaciones de anfibios. A fin de preservar las especies amenazadas, resulta de interés estudiar los mecanismos de toxicidad de distintos contaminantes a lo largo de todo el ciclo de vida, especialmente en las etapas más tempranas, por ser generalmente acuáticas y muy susceptibles a dichos agentes. Entre los metales pesados esenciales para los organismos, el níquel es uno de los menos estudiados, a pesar de encontrarse presente en concentraciones tóxicas en muchos escenarios naturales. Se expusieron grupos de 400 embriones, por triplicado, a NiCl2 4 mg/L (subletal) y 10 mg/L (letal para los estadios más sensibles del desarrollo embrionario). Este procedimiento fue realizado en los estadios de Blástula (E7), Gástrula (E11), Brote caudal (E17), Circulación en aleta (E22) y Opérculo completo (E25). Transcurridas 24hs, los grupos tratados más sus respectivos controles fueron homogeneizados y centrifugados a 11.000 rpm por 20 min. Luego, en el sobrenadante, se determinaron: malodialdehido (MDA) como índice de peroxidación lipídica; grupos carbonilos en proteínas como indicadores de daño a proteínas y las actividades enzimáticas catalasa (CAT) y superóxido dismutasa (SOD) como mecanismos de defensa antioxidante. El MDA mostró una disminución progresiva y en forma significativa a partir del E22 en los embriones controles presentando un incremento también significativo exclusivamente para el E17 con 10 mg Ni2+/L. Las determinaciones de SOD y CAT indicaron que los embriones en E7 presentan valores de 0,30 U/mg proteínas y 3 mmoles/mg proteínas respectivamente, que resultaron entre 3 y 10 veces superiores a los de otros estadios del desarrollo embrionario, verificándose en los tratamientos con Ni 10 mg /L un incremento significativo en la CAT para los E7 y 17 y una reducción también significativa para la SOD en E17. Analizado el perfil de activad SOD en función de cortos períodos de tiempo de exposición (1-6 hs) se verificó una disminución temprana (una hora de exposición a Ni 10mg/L) con una recuperación posterior. Los resultados basados en parámetros tradicionales para medir estrés oxidativo permiten comprobar cambios significativos en función de los diferentes estadios del desarrollo embrionario estudiados y que de las 2 concentraciones de Ni evaluadas la menor no produjo cambios significativos a las 24hs, mientras que la mayor resultó en una reducción en SOD e incremento en CAT, aunque limitados a algunos estadios del desarrollo. Los resultados sugieren la participación del estrés oxidativo en el mecanismo de acción del Ni. Para confirmar esta hipótesis, se han iniciado ensayos a menores tiempos de tratamiento, en presencia y ausencia de antioxidantes.