INFORME TECNICO. VALIDACION DEL SUERO ANTI-NITROTIROSINA

DI SCIULLO MARÍA PAULA

2022-01-03/2023-08-31

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Biológica

Prom.Gral.del Conoc.-Cs.Medicas

Nitrotirosina (NTyr) es el producto de la reacción de nitración entre residuos tirosina con especies reactivas de nitrógeno. La nitración de proteínas en residuos tirosina es un marcador de estrés nitrosativo y de potencial daño biológico y juega un rol en el desarrollo de diversas enfermedades, como procesos inflamatorios agudos y crónicos, enfermedades neurológicas degenerativas, metabólicas, autoinmunes y cáncer. Su determinación es de vital importancia para entender las bases moleculares de la patogénesis o respuesta a xenobióticos en sistemas biológicos. En esta contribución se presenta la metodología, procedimientos y resultados de la validación del suero anti-NTyr generado previamente en conejos por el Dr. Darío Ramírez. El presente proyecto fue dirigido por el Dr. Ramírez en el Laboratorio de Medicina Experimental y Traduccional del IMIBIO-SL. El objetivo fue evaluar los anticuerpos anti-NTyr presentes en el suero para ser ofrecidos a otros grupos de investigación y equipos de docencia de la UNSL y colaboradores, o en convenios de transferencia tecnológica sólo para uso en investigación. El suero fue evaluado por los métodos de Bradford y Western Blot y su especificidad fue estudiada por la técnica de ELISA. El suero no presenta inmunorreacción contra su antígeno diana puro o en muestras de tejido. Su especificidad fue demostrada, ya que no reconoce otras proteínas en muestras de células no nitradas y negativas para la proteína carrier. Sin embargo, dado el alto background o ruido de fondo evidenciado, se recomienda realizar una purificación de los anticuerpos y una nueva validación de los mismos para comprobar su efectividad.