Evaluación de contaminantes bacterianos en espejos de agua de la Ciudad de Buenos Aires utilizando distintos métodos rápidos de identificación

TRIPODI V, OKLANDER L, CORACH D.

Buenos Aires, Argentina.

Congreso; Congreso Latinoamericano de Microbiología y X Congreso Argentino de Microbiología; 2004

Asociación Argentina de Microbiología

Hasta el momento, han sido descriptas una gran cantidad de patologías asociadas al contacto con aguas de pobre calidad microbiológica. Los métodos utilizados actualmente para determinar la calidad del agua, son diseñados para poner en evidencia la presencia potencial de patógenos por rastreo de organismos indicadores (Escherichia coli, coliformes totales, coliformes termotolerantes, etc.) los que no son necesariamente patógenos por sí mismos. Sin embargo, ningún organismo o grupos de organismos usados como indicadores satisface completamente los criterios para convertirse en un indicador confiable de contaminación. Si bien los indicadores utilizados hasta el momento resultan muy útiles en primera instancia, las importantes consecuencias del contacto humano con aguas contaminadas justifica complementar el análisis con la evaluación individual de la flora bacteriana más abundante. Con el objeto de acceder a resultados confiables e informativos se diseñó un ensayo comparativo de métodos rápidos cualitativos, basados en la caracterización de fenotipos bioquímicos y en el análisis molecular de un gen polimórfico, el 16S ARN ribosomal (16S ARNr ), así como de la evaluación cuantitativa, mediante el cultivo en sistemas de películas recubiertas con medios selectivos y agentes gelificantes. Se muestrearon 17 cuerpos de agua recreativas de la Capital Federal. Estas muestras fueron cultivadas en cuatro medios selectivos que permiten evidenciar los microorganismos más frecuentes y sus características morfológicas. Las colonias aisladas fueron analizadas por: a) método 1 (8 ensayos bioquímicos, Argentina) y b) método 2 (20 ensayos bioquímicos, Francia) ambos complementados con la prueba de la oxidasa. Se halló un 62.5% de discrepancia entre ambos métodos y un 32.5% de las bacterias analizadas no pudieron resolverse de manera directa, hecho que obligó a la confirmación de identidad mediante un sistema de amplificación por PCR de una porción del gen 16S ARNr bacteriano (posiciones 1170 a 1540, en E.coli) con posterior secuenciación obteniéndose una identidad superior al 99% respecto de los prototipos de las bases de datos internacionales. Conclusiones: 1) La identificación molecular es un método de elevada confiabilidad cuando los sistemas convencionales resultan ambiguos 2) Del análisis cualitativo de las aguas recreacionales analizadas se observa predominio de Pseudomonas aeruginosa (100%), E. coli (88.2%), Enterobacter sp (64.7%), Klebsiella sp (53%), Citrobacter freundii (41.2%), Stenotrophomona maltophilia (29.4%), Proteus sp. (20%) y Morganella morganii (11.8%). 3) Del análisis cuantitativo se concluye que existe una elevada contaminación en los espejos de aguas analizados que superan los límites aceptables de contacto inocuo (<1000 colonias/100mL, para contacto secundario), predominantemente en las aguas de Río de la Plata y Riachuelo.