NUEVOS GENES IMPLICADOS EN LA RESISTENCIA A PÉPTIDOS MICROBICIDAS EN Salmonella enterica

JULIETA BARCHIESI; MARTÍN ESPARIZ; FERNANDO C. SONCINI

Rosario

Congreso; VI Congreso Rosarino y XXIII Reunión Anual de la Sociedad de Biología de Rosario; 2003

La producción de péptidos microbicidas es una estrategia de defensa utilizada por diversas especies contra microorganismos patógenos. Sin embargo, ciertas bacterias han coevolucionado con sus hospedadores adquiriendo mecanismos de resistencia a tales péptidos. Tal es el caso de Salmonella enterica serovar Typhimurium, para la cual dicha resistencia es esencial para colonizar los tejidos del hospedador infectado. En Salmonella se han identificado dos sistemas regulatorios involucrados en la resistencia a péptidos microbicidas: PhoP/PhoQ, y PmrA/PmrB. Estos sistemas regulan modificaciones en el LPS que le confieren a la bacteria una mayor resistencia frente a péptidos catiónicos. Además, se han identificado tres loci independientes de estos sistemas regulatorios que afectan la resistencia a péptidos. En este trabajo se pretende ampliar el conocimiento de las herramientas utilizadas por parte de bacterias patógenas durante el proceso infeccioso para colonizar y evadir los mecanismos de defensa del hospedador infectado. Para tal fin se realizó el análisis genético de un operón que aumenta la resistencia bacteriana a péptidos microbicidas como protamina y cecropina P1. Mutantes insercionales en este operón no mostraron recuento de colonias en hígado de ratones C3H/HeN. Además, mostraron ser 10 veces menos eficientes en la internalizacion a macrofagos respecto a la cepa salvaje. Resultó interesante que estas mutantes fueron capaces de replicarse en macrófagos, indicando que la resistencia a péptidos microbicidas no esta asociada a la supervivencia en dichas células. Sorprendentemente, las mutantes presentaron swarming defectivo y resultaron se más resistentes a polimixina B con respecto a la salvaje, lo cual parece un efecto dependiente de PmrA/PmrB. Concordantemente, el perfil de LPS de esta cepa es similar al de cepas con expresión constitutiva de PmrA. Sin embargo, su expresión es independiente tanto de PmrA/PmrB como de PhoP/PhoQ. Estos fenotipos pudieron ser complementados al trasformar a las mutantes con un plasmido que contiene una copia del operón salvaje. Estos resultados sugieren que los genes del operon en estudio tienen un rol en la etapa inicial de la infección de Salmonella.