Efecto de Cr(VI) y fenol sobre la membrana citoplasmática de Acinetobacter guillouiae SFC 500-1A: cambios en el estado físico y modulación de las actividades lípido quinasas y fosfolipasas

MARILINA FERNANDEZ; PAULUCCI N; MICAELA PEPPINO; BIASUTTI, MARÍA A.; VILLASUSO ANA; GONZALES PAOLA

SAN LUIS

Congreso; VII Congreso Argentino de la Sociedad de Toxicología y Química Ambiental; 2018

A. guillouiae SFC500-1A se aisló de sedimentos de una curtiembre contaminados con cromo y fenol yfue capaz de remover simultáneamente dichos contaminantes con elevada eficiencia. El fenol fuemetabolizado vía catecol 1,2-dioxigenasa y el Cr(VI) reducido mediante cromato reductasas. En estetrabajo se analizó el efecto de Cr(VI) (25 mg/L) y/o fenol (300 mg/L), sobre la membrana citoplasmáticade A. guillouiae SFC500-1A, evaluando los cambios en el estado físico, en la composición de fosfolípidos(PLs) y ácidos grasos (FAs) así como las variaciones en la actividad de enzimas involucradas enseñalización celular (lípido quinasas y fosfolipasas). Para ésto, se realizaron ensayos de polarización defluorescencia, extracción y separación de PLs mayoritarios marcados con [1-14C] y minoritariosmarcados con [γ32P], análisis de FAs mediante GC-MS, y medición de las actividades fosfolipasa D y A2(PLD y PLA2) utilizando sustratos fluorescentes.Se observó que los tratamientos con Cr(VI) y Cr(VI)+fenol generaron cambios en los parámetrosanalizados, pero el fenol por sí sólo no produjo alteraciones sobre la membrana, probablementeporque se metaboliza completamente. Los cambios frente a Cr(VI) y a Cr(VI)+fenol implicaron unaumento rápido de la rigidez de la membrana citoplasmática, que se intensificó después de 16 h porun incremento en cardiolipina (CL), una disminución en fosfatidiletanolamina (PE), así como unadisminución en la relación de los FAs insaturados/saturados. La disminución de PE podría deberse enparte a la actividad de PLA2, que aumentó significativamente en estas dos condiciones. Además, elCr(VI) y ambos contaminantes en simultáneo, modificaron los niveles de los PLs minoritarios, talescomo fosfoinosítidos (PIPs) y ácido fosfatídico (PA). Se sugiere que el PA, producto de la ruta de losfosfoinosítidos (PLC/DGK), desempeñaría funciones claves en la activación de diferentes componentesde vías de señalización, algunos de los cuales podrían activar a genes que codifican para cromatoreductasas u otras enzimas, responsables de la atenuación del estrés o daño causado por la exposiciónal metal. No se logró determinar la actividad PLD, sin embargo, se detectó el determinante genéticoque codificaría para esta enzima.Estos resultados contribuyen a la comprensión de los procesos que ocurren a nivel de membranacuando A. guillouiae SFC500-1A se expone a Cr(VI) y fenol, que constituirían respuestas adaptativasfrente a condiciones ambientales adversas.