ESTUDIO PRELIMINAR DE UNA TOXINA DE LOS HUEVOS DE POMACEA MACULATA PERRY, 1810 (ARCHITAENIOGLOSSA, AMPULLARIIDAE)

GIGLIO, ML; ITUARTE, S; HERAS, H

La Plata

Congreso; 1er Congreso Argentino de Malacología; 2013

Asociación Argentina de Malacología

Pomacea maculata es un caracol de agua dulce, con distribución pantropical y mayor diversidad en América del sur, que deposita sus huevos por encima del agua, en la vegetación emergente y otros sustratos. Esta estrategia reproductiva es muy inusual para un invertebrado acuático exponiendo los huevos al sol, desecación y depredadores terrestres. Para enfrentarse a estas condiciones severas algunos han desarrollado estrategias interesantes. Estudios previos en P. canaliculata indican que una de estas estrategias corresponde a la adquisición de una proteína con efecto neurotóxico, PcPV2. Es el objetivo de este trabajo buscar en los huevos de P. maculata una proteína con propiedades neurotóxicas, similar a PcPV2. Adultos de P. maculata fueron recolectados cerca del Río Paraná en San Pedro, Buenos Aires, y mantenidos en acuarios para obtener puestas. La proteína fue aislada y purificada a partir de huevos combinando centrifugación secuencial, ultracentrifugación en gradiente y cromatografía. La fracción aislada fue analizada por electroforesis, para determinar su peso molecular así como la composición y peso molecular de sus subunidades. Para el ensayo de toxicidad se utilizaron ratones BALB/c hembra separados en grupos de 5 individuos que fueron inyectados por vía intraperitoneal con 0,25 ml de buffer salino (controles) o 0.25 ml de diferentes diluciones seriadas de PmPV2. Los ratones fueron observados cada 24 h durante 96 h y se registró el número de muertes y los síntomas presentados por los sobrevivientes. Pomacea maculata presenta una perivitelina tóxica, con un peso molecular de 465 kDa, conformada por heterodímeros de 98 kDa, compuestos por subunidades de 68 kDa y 30 kDa unidas por puente/s disulfuro. Estas características se asemejan a las de PcPV2, de P. canaliculata, por lo que denominamos a esta proteína PmPV2. La proteína produce una alta mortalidad en los ratones, así como debilitamiento, parálisis de los miembros posteriores, movimientos espásticos de la cola, entre otros, muy semejante a lo observado para PcPV2. Clásicamente se consideraba a las perivitilinas como proteínas de reserva, pero los estudios actuales indican que se trata de proteínas multifuncionales, pudiendo incluso representar defensas químicas, que incluyen inhibidores de proteasas, aglutinantes y antioxidantes y entre las cuales ahora se destacan estas proteínas con funciones neurotóxicas.