Evaluacion de citoquinas en sangre perife¦rica de pacientes pediatricos con asma atopico en estabilidad y en crisis.

CONSTANZA OTERO; R. PAZ; N. GALASSI; A. TEPER; M. KOHAN; L. BEZRODNIK; S. GOLDSTEIN DE FINK; M. FINIASZ

Mar del Plata, Buenos Aires, Argentina

Congreso; Reunion cientifica anual SAI-SAIC; 2009

Sociedad Argentina de investigacion Clinica/ Sociedad Argentina de Inmunologia

Se ha descripto en los pacientes con asma at¨®pico un perfil de citoquinas con predominio Th2, aunque presentan un cuadro de inflamaci¨®n permanente que se asocia con la presencia de citoquinas Th1. Esta inflamaci¨®n es mayor en el momento de la crisis asm¨¢tica. La mayor¨ªa de los estudios publicados emplean c¨¦lulas purificadas, lo que puede dar una visi¨®n incompleta de la respuesta inmune. En este estudio evaluamos la producci¨®n de citoquinas en sangre entera de pacientes asm¨¢ticos pedi¨¢tricos en momentos de estabilidad (Intercrisis, Int) o de exacerbaci¨®n (Crisis, Cr). Para ello se realiz¨® la determinaci¨®n por citometr¨ªa de flujo estimulando una muestra de sangre perif¨¦rica con PMA/ionomicina y tratando con brefeldina durante 4 horas. Luego se fijaron y permeabilizaron las c¨¦lulas,  y se marcaron con anti-CD3 y anticuerpos dirigidos contra distintas citoquinas. Se determin¨® el porcentaje de c¨¦lulas CD3 positivas para interfer¨®n gamma (IFN¦Ã), factor de necrosis tumoral alfa (TNF¦Á), interleuquina (IL)-4, IL-5, IL-10 e IL-13  con los siguientes resultados: (%, X+ ES) IFN¦Ã Int 11,4+4,0 (n=8 ); Cr 9,9+5,6 (n=6); TNF¦Á Int 9,1+2,9 (n=8); Cr 6,0+3,3 (n=6); IL-4 Int 0,6+0,2 (n=8); Cr 0,3+0,1 (n=6);IL-5 Int 0,8+0,3 (n=9); Cr 2,0+1,0 (n=7); IL-10 Int 0,2+0,1 (n=5); Cr 0,2+0,1 (n=5); IL-13 Int 1,6 y 0,6 (n=2); Cr 0,3+0,1 (n=3). No se observan diferencias significativas en los pacientes en per¨ªodo de estabilidad y de exacerbaci¨®n asm¨¢tica, ni tampoco con los datos de controles sanos (datos no mostrados). Los resultados muestran un porcentaje de c¨¦lulas productoras de IFN¦Ã y TNF¦Á mayor que de IL-4, IL-5, IL10 e IL-13, es decir que el perfil de producci¨®n in vitro de citoquinas ser¨ªa Th1, con predominio de citoquinas inflamatorias en ambos grupos de pacientes.