VALIDACIÓN DE UN MODELO DE RATÓN DE NEOVASCULARIZACIÓN CHOROIDAL (CNV) INDUCIDA POR LÁSER.

BARCELONA PF; SUBIRADA PV; SABBI, TN; MÁRQUEZ, MA; VAGLIENTI, MV; RIDANO ME; MÁRQUEZ, MA; PAZ MC; LUNA JD; SANCHEZ MC

Congreso; XII Congreso de investigaciones en Visión y Oftalmología; 2018

Introducción: La degeneración macular relacionada con la edad (AMD) en su formaneovascular es una de la principales causa de pérdida de la visión en adultos mayores de 55años. En el presente estudio, validamos un procedimiento establecido para la inducción de laneovascularización coroidea (CNV) en ratones. Este procedimiento consiste en la perforaciónde la membrana de Bruch mediante fotocoagulación inducida por láser, reproduciendo la formaneovascular de AMD.Objetivo: Caracterizar el proceso neovascular y su impacto en la funcionalidad retinal así comosu perfil inflamatorio. Trabajos previos realizados en nuestro laboratorio demostramos que tantoα2M y su receptor (LRP1) participan durante la NV retinal, por lo que también nos centramos enla participación del sistema α2M/LRP1.Métodos: Ratones C57BL/6, 3-6 meses de edad, previamente anestesiados se les practicaroncuatro lesiones de fotocoagulación por ojo, con un láser de argón verde. Después de 7 días derealizadas las quemadura por láser, analizamos la lesiones de NV en flatmount de coroidesRPE mediante tinción con isolectina B4 utilizando microscopía confocal. Al mismo tiempo,mediante inmunotincion de marcadores específicos se caracterizaron las diferentes poblacionescelulares localizadas en el área de la lesión: CD105 (célula endotelial), NG2 (pericitos), F4/80(microglia), así como la distribución del receptor LRP1 en estas células. Además, niveles deproteína de α2M y LRP1 fueron analizaron por ensayos de WB y el perfil inflamatorio, evaluadopor los niveles de IL1β, IL6 y TNFα mediante ensayo de qPCR. La funcionalidad de la retina seevaluó mediante ERG escotópio.Resultados: Pudimos estandarizar el tamaño de la lesión. Se observó una cantidad importantede célula endotelial y pericitos alrededor de la lesión. Mientras que las células de la microglia selocalizaron en el área central y periférica de la lesión. Mientras que α2M y LRP1 mostraron unaumento en el nivel de proteína acompañado de un gran patrón de expresión en célulascercanas a la lesión. Como así también se evidencio altos niveles de factores proinflamatorios yproangiogénicos. Las ondas a y b de ERG escotópicas se redujeron (p