Evaluación genotóxica y aislamiento biodirigido de compuestos antibacterianos y antirradicalarios en el extracto hidroalcohólico de Fridericia caudigera

TORRES, CAROLA ANALÍA; SÁNCHEZ, CYNTHIA NOELIA; MARTÍNEZ MEDINA, JUAN JOSÉ; NUÑEZ, MARÍA BEATRIZ; ZAMPINI, IRIS CATIANA

Lima

Congreso; 31 Congreso Latinoamericano de Química (CLAQ-2014), XXVII Congreso Peruano de Química; 2014

Sociedad Química del Perú

Fridericia caudigera (Bignoniaceae) es una enredadera que crece en el Norte argentino. En nuestro estudio, su extracto hidroalcohólico ha demostrado actividad antimicrobiana y antirradicalaria. El objetivo de este trabajo fue evaluar la potencial genotoxicidad/mutagenicidad del extracto crudo de F. caudigera y aislar e identificar algunos de los compuestos relacionados con sus actividades biológicas. Para determinar la genotoxicidad del extracto crudo se utilizó el test de Ames, usando dos cepas de Salmonella typhimurium, TA98 y TA100, mediante el método de incorporación directa en placa. El extracto se ensayó en un rango de concentración de 250 a 1000 µg de compuestos fenólicos totales/placa. Los resultados se expresaron como el número de revertantes por placa y se determinó el Indice mutagénico (IM). El aislamiento de los compuestos con actividades biológicas fue biodirigido por ensayos autográficos y bioautográficos. El extracto hidroalcohólico fue sometido a cromatografía en capa fina (CCF) usando cromatoplacas de silicagel y dos sistemas de solventes (SS): SS1- cloroformo-metanol (9:1) y SS2- tolueno-acetato de etilo-ácido acético (36:12:5). Los ensayos autográficos fueron realizados utilizando dos radicales libres, DPPH y ABTS+ y se detectaron en los cromatofolios desarrollados, las bandas que mostraron capacidad de depurar los radicales libres. Las bioautografías, se llevaron a cabo utilizando dos aislamientos clínicos de S. aureus (uno sensible y otro resistente a meticilina), luego de la incubación, las placas se revelaron con una sal de tetrazolio y las zonas de inhibición del crecimiento bacteriano se observaron como bandas amarillas sobre un fondo violeta. Mediante CCF se determinaron los valores de Rf de las bandas con actividad biológica y las mismas fueron aisladas mediante CCF preparativa. Luego fueron sometidas a un proceso de purificación por cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) en fase reversa. La identificación de los metabolitos fue realizada por espectroscopía UV-Visible, por HPLC acoplado a espectroscopía de masa y co-inyección con estándares por HPLC analítica. El extracto crudo no mostró efecto mutagénico en ninguna de las concentraciones evaluadas. Estos resultados indican la ausencia de fitoquímicos que induzcan mutaciones del tipo frameshift detectadas por TA----o mutaciones que causen sustituciones de pares de bases G-C, detectada por TA----. Mediante el aislamiento bioguiado fueron identificados tres compuestos con actividad antibacteriana y antirradicalaria del tipo flavonas: apigenina, crisina y luteolina. Estos compuestos serían en parte los responsables de la actividad antimicrobiana y antioxidante del extracto crudo.