Capacidad solubilizadora de fosfatos inorgánicos del aislamiento INTA 293-1 de Bacillus thuringiensis

SAUKA, D.; PICCINETTI, C.; LOPEZ, N.; VALLEJO, D.; RUBIO, E.; PERTICARI, A.; BENINTENDE, G.

Rosario

Congreso; XXIII Congreso Latinoamericano de Microbiología y XIV Congreso Argentino de Microbiología; 2016

AAM

Los microorganismos capaces de disolver fuentes de fósforo inorgánico juegan un papel importante en la nutrición de las plantas porque mejoran la disponibilidad de este nutriente. Bacterias de los géneros Pseudomonas, Bacillus y Rhizobium se encuentran entre los solubilizadores de fosfatos más poderosos. La especie Bacillus thuringiensis, considerada tradicionalmente como entomopatógena por excelencia, ha sido clasificada recientemente dentro de ese grupo selecto, al reportarse cepas con capacidad solubilizadora de esas sales inorgánicas. En este trabajo se reporta la caracterización de un aislamiento argentino de B. thuringiensis, inicialmente seleccionado por su capacidad de solubilizar Ca3(PO4)2. El aislamiento INTA 293-1 fue obtenido de una muestra de suelo de la provincia de Corrientes. Fue identificado como B. thuringiensis por la presencia de cristales parasporales y análisis de un fragmento del gen 16S rRNA. Se individualizaron cristales bipiramidales y cúbicos en microscopio de contraste de fases. Mediante SDS-PAGE se observaron dos bandas de ca. 130 y 65 kDa asociadas a la morfología de cristales. Mediante amplificación génica (PCR) y variantes se procedió a la detección de genes que codifican proteínas tóxicas para insectos del orden Lepidoptera (cry1, cry2 y vip3A), Coleoptera (cry3, cry7, cry8, cry23 y cry37) y Diptera (cry4, cry11, cyt1 y cyt2), y de genes asociados a la síntesis de -exotoxina y zwittermicina. Se obtuvo un perfil génico claramente lepidoptericida: cry1Ac, cry1Ia, cry2Aa, cry2Ab y vip3Aa. Genotipo -exo-, zma-. Se evaluó la toxicidad usando larvas neonatas de Spodoptera frugiperda empleando 50 g.ml-1 de una suspensión espora-cristal. Luego de 7 días a 29°C se verificó una mortalidad del 27,1±2,1%. La capacidad para solubilizar diversas fuentes de fosfatos inorgánicos fue evaluada en caldos de B. thuringiensis INTA 293-1 en medio NBRIP adicionado con Hidroxiapatita (OH-P), Roca Fosfórica (RF-P) y Fosfato de Aluminio (Al-P) en agitación a 30°C. El monitoreo del fósforo disuelto fue a las 48, 120 y 168 h desde la siembra; siendo particularmente eficaz en solubilizar la OH-P (hasta 101,3±2,6 mg.L⁻¹), luego la RF-P (hasta 11,0±0,5 mg.L-1) y en menor medida el Al-P (hasta 2,2±0,4 mg.L⁻¹). Nuestros resultados permitirían concluir que B. thuringiensis INTA 293-1 es una bacteria que codifica proteínas tóxicas para lepidópteros, capaz de solubilizar diferentes fuentes de fosfato inorgánico con distinta eficacia. Este estudio revela potencialidades poco exploradas de esta especie y abre el camino al desarrollo de nuevos bioinsumos. De acuerdo a nuestro leal saber, este sería el primer reporte de un B. thuringiensis aislado en nuestro continente con comprobada actividad insecticida capaz de solubilizar fosfatos inorgánicos.