Primer reporte de cepas argentinas de Bacillus thuringiensis con actividad nematicida

SAUKA, D.; MAESTRO, M.; BENINTENDE, G.

Rosario

Congreso; XXIII Congreso Latinoamericano de Microbiología y XIV Congreso Argentino de Microbiología; 2016

AAM

La bacteria Bacillus thuringiensis es reconocida tradicionalmente por producir durante la esporulación uno o más cuerpos parasporales cristalinos de naturaleza proteica responsables de actividad toxica para diversos artrópodos. Algo menos conocido es la existencia de ciertas cepas que son tóxicas para nemátodos. Su mecanismo de acción principal se ejerce a través de la ingestión de proteínas Cry específicas que resultan en intoxicación, daño intestinal y la consecuente muerte del nematodo. La b-exotoxina que pueden producir algunas cepas, un metabolito termoestable con actividad toxica inespecífica para insectos y células de mamíferos, también ha sido asociado a la actividad nematicida. El objetivo del presente trabajo fue evaluar la toxicidad de cepas nativas de B. thuringiensis sobre larvas del nematodo de vida libre Panagrellus redivivus. La cepa de B. thuringiensis en estudio se sembró en todas direcciones sobre una placa de agar de esporulación BM empleando un hisopo estéril embebido en una suspensión concentrada de esporas. Las placas se incubaron a 29ºC hasta esporulación completa. A continuación, unos 100 ul de una suspensión concentrada en larvas de P. redivivus se dispersó sobre la placa que contenía la cepa estudiada. Todo este procedimiento se realizó al menos por duplicado. Se calculó el porcentaje de mortalidad contando las primeras 20 a 50 larvas observadas bajo microscopio óptico (100 x) después de 24 hs de incubación a 25ºC. Se analizaron 30 cepas argentinas pertenecientes a la colección del IMYZA-INTA. Se utilizó la cepa HD-1 de B. thuringiensis serovar kurstaki como control negativo y placas de agar BM sólo con nematodos como control de viabilidad. Se obtuvieron 28 cepas que demostraron una mortalidad ≤25%, 1 entre 25-75%, 1 mayor al 75%. Por otra parte, la mortalidad natural en los controles nunca superó el 5%. Dentro del primer grupo (mortalidad ≤25%), no se hallaron diferencias significativas entre los distintos tratamientos y la mortalidad del control negativo (cepa HD-1). Esto denotaría cierto grado de toxicidad basal cuando P. redivivus es expuesto a altas concentraciones de B. thuringiensis. Las cepas nativas INTA H48-5 (productora de b-exotoxina) y Mo14-4 (catalogada como ?no tóxica? para insectos) resultaron ser las más tóxicas para P. redivivus con mortalidades del 53,7±1,3% y 98,7±0,7% respectivamente. Este estudio preliminar constituye, de acuerdo con nuestro conocimiento, el primer reporte de cepas argentinas de B. thuringiensis tóxicas para nemátodos.