Estudio de tamizaje de Bacillus thuringiensis tóxicos para Alphitobius diaperinus

PÉREZ, M.; SAUKA, D.; ONCO, M.; BENINTENDE, G.

Buenos Aires

Congreso; III Congreso Argentino de Microbiología Agrícola y Ambiental; 2015

Asociación Argentina de Microbiología

Alphitobius diaperinus, conocido como el "escarabajo de la cama de pollo" es un coleóptero dela familia Tenebrionidae que afecta instalaciones avícolas produciendo daños físicos en las mismas, efectos traumáticos en las aves, es vector y reservorio de enfermedades aviares, y puede inducir reacciones alérgicas en los trabajadores de las granjas. Su control está basado principalmente en el uso de productos químicos, pero su aplicación indiscriminada puede generar resistencia en el insecto, posible intoxicación o contaminación de las aves de producción así como también de los trabajadores. Una estrategia complementaria o alternativa de control podría incluir el uso de bioinsecticidas a base de Bacillus thuringiensis. Esta bacteria entomopatógena se caracteriza por producir cristales proteicos durante la esporulación, los que junto a otros factores de virulencia liberados al medio durante la fase vegetativa de crecimiento son responsables de la toxicidad para distintos órdenes de insectos. El objetivo de este trabajo fue la selección de B. thuringiensis tóxicos para larvas de A. diaperinus y la determinación de la fracción de los cultivos que contienen el o los ingredientes activos. Se analizaron 19 aislamientos nativos y 21 cepas exóticas de B. thuringiensis pertenecientes al cepario del IMYZA-INTA. El cultivo completo se obtuvo sembrando 50 μl de una suspensión concentrada espora-cristal de los mismos en 50 ml de caldo de esporulación BM e incubando en agitación durante 72 hs a 29ºC. La biomasa y el sobrenadante fueron obtenidos por centrifugación de los cultivos completos. Cada tratamiento fue suministrado en la dieta larval en una proporción del 15 % y se fraccionó en dos placas de poliestireno de 24 pozos (Nunc 143928). Para el control negativo sólo se agregó a la dieta agua destilada estéril. Se colocó una larva de 2º estadio de A. diaperinus por pocillo. La mortalidad se registró luego de 7 días de incubación a 29ºC y los resultados corregidos por la mortalidad natural con la fórmula de Schneider-Orelli. Los cultivos completos de todas las cepas presentaron mortalidades menores al20%, exceptuando al aislamiento nativo INTA Mo4-4 que presentó la mayor toxicidad (41,9±10,8%). El porcentaje de mortalidad de su biomasa (45,8±16,8%) resultó significativamente más elevado que el de su sobrenadante (4,2±0,0%). Estos estudios permitieron seleccionar un aislamiento nativo de B. thuringiensis tóxico para A. diaperinus, donde los factores de virulencia responsables de la acción tóxica se hallaron en la biomasa. Estudios toxicológicos posteriores utilizando esta fracción nos permitirán detectar la concentración letal media y avanzar en el desarrollo de un bioinsecticida para el control de esta plaga.