Búsqueda de Bacillus thuringiensis tóxicos para Anthonomus grandis Boheman (Coleoptera: Curculionidae)

PEREZ M; SAUKA D; ONCO I; MONELLA R; BENINTENDE G.

Buenos Aires

Congreso; XII Congreso Argentino de Microbiología. VI Congreso de la Sociedad Argentina de Bacteriología, Micología y Parasitología Clínica (SADEBAC). I Congreso de Microbiología Agrícola y Ambiental (DiMAyA); 2010

Asociación Argentina de Microbiología

El picudo del algodonero, Anthonomus grandis Boheman, es la plaga principal de la planta de algodon en el noroeste argentino. El uso de insecticidas quimicos para su control produce alteraciones al medio ambiente, por lo que el empleo de estrategias biologicas no contaminantes constituye alternativas para el control de esta plaga. El empleo de bioinsecticidas que poseen a labacteria Bacillus thuringiensis como ingrediente activo, representaria una interesante alternativa. B. thuringiensis se caracteriza por producir cristales paraesporales de naturaleza proteica durante la esporulacion, los que junto a otros factores de virulencia liberados al medio durante la fase vegetativa de crecimiento son toxicos para larvas de insectos. El objetivo del trabajo es la busqueda de B. thuringiensis que sean toxicos para larvas de dicha plaga, ya sea a traves de proteinas cristalinas y/o de otras que pueda secretar al medio. Se analizaron 59 cepas nativas de B. thuringiensis de diferentes regiones del pais y 27 cepas exoticas provenientes de colecciones internacionales, todas pertenecientes al cepario del IMYZA-INTA. Los bioensayos de toxicidad fueron realizados utilizando el metodo de incorporacion en dieta. Se preparo40 mL de dieta artificial a la que se le agrego en proporcion 1/10 el volumen de cultivo completo de la cepa en estudio y se fracciono de a 300 ¦Ìl por pocillo en dos placas de poliestireno de 24 pozos (Nunc 143928). El cultivo se obtuvo tras sembrar 50 ¦Ìl de una suspension espora-cristal de la cepa en 50 mL de caldo de esporulacion BM e incubado en agitacion durante 72 hs. Para el control negativo solo se agrego a la dieta agua destilada esteril. En cada pocillo se coloco una larva neonata transferida con la ayuda de un pincel. La mortalidad se registro luego de 7 dias de incubacion a 28 ºC y los resultados fueron corregidos por la formula de Schneider-Orelli. Se obtuvieron 25 cepas nativas con una mortalidad menor a 20%, 20 entre 20 y 30%, 9 entre 30 y 40%, 4 entre 40 y 50% y 1 con mas del 50%. Dentro de las cepas exoticas,10 presentaron un porcentaje de mortalidad menor a 20%, 6 entre 20 y 30%, 5 entre 30 y 40%, 1 entre 40 y 50% y 5 con porcentajes mayores a 50%. La cepa nativa INTA H48-5 con una mortalidad del 69,6 +- 2,9%, y las cepas exoticas de los serovares thompsoni HD542 con 77,1 +- 2,5% y tolworthi HD125 con 63,6 +- 6,4% resultaron las mas toxicas. Estos estudios toxicologicos preliminares permitieron la seleccion de cepas nativas y exoticas de B. thuringiensis con una patogenicidad moderada para Anthonomus grandis. Estudios toxicologicos posteriores empleando la biomasa y sobrenadante de cultivo por separado permitiron determinar la fraccion responsable de esa actividad toxica y la potencialidad de la misma para el biocontrol de la plaga.