Coexistencia de genes vip codificantes de toxinas para lepidópteros y coleópteros en Bacillus thuringiensis

SAUKA, D.H.; ONCO, M.I.; PÉREZ, M.P.; RODRÍGUEZ, S.E.; BENINTENDE, G.B.

Resistencia

Jornada; XIV Jornadas Argentinas de Microbiología. III Jornada de Microbiología e Infectología del NEA.; 2011

Asociacion Argentina de Microbiologia

Introducción: la bacteria entomopatógena Bacillus thuringiensis se caracteriza por su capacidad de producir durante la esporulación, inclusiones cristalinas parasporales que pueden estar formadas por proteínas insecticidas Cry y Cyt. Algunas cepas de B. thuringiensis pueden producir también otra clase de proteínas insecticidas durante la fase de crecimiento vegetativo y que no forman cristales que se llaman Vip (Vegetative insecticidal proteins). Las proteínas Vip no comparten homología con otras proteínas conocidas y poseen toxicidad para diversas plagas de lepidópteros y coleópteros a través de un mecanismo de acción único. Estos factores de  virulencia enfatizan el posible beneficio de su uso en estrategias de manejo de resistencia, ya que el descubrimiento de genes vip nuevos podrían ser útiles como herramientas contra plagas resistentes. Las proteínas Vip1 y Vip2 constituyen una toxina binaria responsable de dar patogenicidad para ciertos coleópteros y las Vip3 para lepidópteros. La distribución de los genes que las codifican en cepas exóticas y nativas no se conoce en profundidad, siendo escaso el conocimiento de su existencia simultánea en una misma bacteria. Objetivos: aportar información sobre la presencia de genes vip1, vip2 y vip3 en cepas exóticas y nativas de B. thuringiensis. Materiales y métodos: se analizaron 36 cepas exóticas y 50 nativas de B. thuringiensis pertenecientes a la colección del IMYZA-INTA. Se emplearon tres estrategias basadas en amplificación génica (PCR) diseñadas en nuestro laboratorio para la detección de genes vip. Los productos de amplificación de los genes vip3 fueron digeridos posteriormente con DdeI y los fragmentos obtenidos, separados por electroforesis en geles de poliacrilamida al 12% para lograr la identificación de subclase correspondiente. Resultados y conclusiones: se confirmó la presencia de genes vip1, vip2 y vip3Aa en cepas exóticas y nativas de B. thuringiensis. El perfil génico vip1/vip2 se halló en dos cepas exóticas (5,6%) y en una nativa (2,0%), mientras que el vip1/vip2/vip3Aa se detectó sólo en cuatro cepas exóticas (11,1%). La presencia de genes vip3Aa solos se determinó en seis cepas exóticas (16,7%) y en 38 nativas (76,0%). La posibilidad de disponer de cepas que producen simultáneamente proteínas Vip1, Vip2 y Vip3 marca un camino hacia el desarrollo de bioinsecticidas con un espectro de actividad tóxica ampliada a insectos lepidópteros y coleópteros.