Estudio de los polisacáridos del alga Dictyota dichotoma: extracción, fraccionamiento, estructura yactividad antiviral

RABANAL MELISSA; PONCE, NM A; NAVARRO, DIEGO A; GOMEZ RICARDO; STORTZ, CARLOS A

Arequipa

Congreso; XXVI CONGRESO PERUANO DE QUÌMICA MARIANO EDUARDO DE RIVERO Y USTARIZ.; 2012

Sociedad Química del Perú

Las algas pardas (Phaeophyceae) biosintetizan distintos polisacáridos tales como laminaranos, alginatos y fucoidanos. Los fucoidanos son polisacáridos sulfatados que contienen principalmente fucosa y sulfato y menores proporciones de xilosa, galactosa, manosa, y ácidos urónicos. Estos polisacáridos resultan de gran interés debido a sus diversas actividades biológicas como agentes anticoagulantes, antitumorales, antivirales, antitrombóticos, etc. El alga Dictyota dichotoma, proveniente de Bahía Bustamante (Chubut, Argentina), fue molida y extraída con etanol acuoso al 80% primero a temperatura ambiente y luego a 70 ºC. El residuo obtenido se extrajo con HCl (pH 2) a temperatura ambiente (EAF). Los productos obtenidos fueron fraccionados mediante precipitación con bromuro de hexadeciltrimetilamonio (cetrimide), y posterior redisolución con soluciones de NaCl de concentraciones crecientes (0,5 M; 1 M; 1,5 M; 2 M, 4 M y 5 M). Se determinó que EAF estaba constituido principalmente por hidratos de carbono, éster sulfato y ácidos urónicos. Los azúcares componentes eran fucosa (36%), xilosa (18%), manosa (14%) y galactosa (23%). El fraccionamiento con cetrimide permitió aislar 6 subfracciones precipitables (EAF 0,5-5) y una fracción soluble (EAF-0) rica en fucosa y glucosa. En las fracciones precipitadas y redisueltas con NaCl se observó un descenso de fucosa, xilosa y manosa y un incremento de galactosa a medida que aumentaba la fuerza iónica de la solución. Esta última tendencia también se observó en la proporción de grupos sulfatos presentes y en el peso molecular, mientras que una situación inversa se vio para los ácidos urónicos. Todas las fracciones contenían altas proporciones de hidratos de carbono. El estudio por metilación de las distintas fracciones permitió inferir de qué manera estarían conformados los polisacáridos. En la fracción soluble EAF-0 se determinó la existencia de unidades de glucosa enlazadas por posición 3, en menor proporción por 4 y altas cantidades, al igual que la xilosa, como extremo reductor terminal. Para EAF-0,5 se determinó la existencia de un núcleo central constituido por D-manopiranosas con uniones (1→2) de las cuales algunas de ellas estaban además sustituidas en posición 6. Se observó una gran dispersión en el tipo de unión de las unidades de fucosa y altas cantidades de xilosa. EAF-1 poseería un núcleo central formado principalmente por →3)-α-L-Fucp-(1→4), altas proporciones de xilosa y fucosa terminales y cantidades discretas de manosa y galactosa no ramificadas. En EAF-1,5 se observó principalmente que la xilosa estaba enlazada en 2 y la fucosa principalmente como ramificación (extremo no reductor). El núcleo central de la fracción redisuelta EAF-2 presentó D-galactopiranosas con uniones (1→3), galactosas enlazadas por 2 y/o 3, además de una gran polidispersión de unidades de fucosa y manosa. En el caso de EAF-4 se determinó una cadena de →6)- Galp-(1→ y en proporciones menores enlazadas en 2 ,4 y 6. Los resultados de la actividad antiviral mostraron que las fracciones EAF-0.5 y EAF-2 son las que más inhiben la replicación de los herpes tipo 1 y no poseen citoxicidad. Con respecto al virus Coxsackie ?B?, las fracciones redisueltas en 1, 1,5 y 2 M fueron las más inhibidoras de este virus, a diferencia de las fracciones redisueltas en 0,5 y 4 M de NaCl cuyos índices de selectividad fueron bajos