Caracterización del receptor a histamina H4 en células de carcinoma mamario humano y su papel en la proliferación

BRENZONI PG; MARTINEL LAMAS D; MASSARI N; MONDILLO C; NUÑEZ M.; PIGNATARO O; RIVERA ES; MEDINA VA

Mar del Palta

Congreso; LV Reunión Anual de la SAIC, Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2010

SAIC

Previamente reportamos la expresión del receptor a histamina (RH4) en líneas celulares y biopsias de lesiones benignas y malignas de la glándula mamaria humana. Para contribuir al mejor conocimiento del papel del RH4 en el cáncer mamario, en este trabajo comparamos su patrón de expresión, la vía de transducción de señales y las respuestas biológicas asociadas en dos líneas celulares con diferentes características de malignidad (MDA-MB-231, receptor a estrógenos, REα-; MCF-7, REα+). Se determinaron: la acumulación de AMPc por RIA, la proliferación mediante el ensayo clonogénico e incorporación de BrdU, la apoptosis mediante el ensayo de TUNEL y Anexina-V y la senescencia a través de la actividad de β-galactosidasa, empleando agonistas del RH4 [clobenpropit (clob) y VUF8430 (VUF)] y el antagonista JNJ7777120. El patrón de expresión determinado por Western blot, resultó diferente en ambas líneas celulares, mostrando la presencia de diversas especies moleculares del RH4 que incluyen isoformas y oligómeros. En las células MDA-MB-231, los tratamientos con clob y VUF disminuyeron la proliferación al 45.5±14.8% y 76.7±5.3%, respectivamente. Este efecto se asoció a una reducción de la incorporación de BrdU, a la inducción de apoptosis observándose un aumento del porcentaje de células Anexina-V y TUNEL-positivas [12.5±0.5 (VUF), 14.5 ±0.5 (clob) vs. 3.1±0.6, P<0.01), y a un aumento de la senescencia (2.5-veces, P<0.01). En las células MCF-7, los agonistas inhibieron el aumento de AMPc producido por forskolina en un 30% y la proliferación en un 50%, aumentando el tiempo de duplicación de 32.6±1.3 a 47.2±0.8 y 44.1±3.1 h con clob y VUF, respectivamente (P<0.05). Además, incrementaron el porcentaje de células apoptoticas (3-veces, P<0.01) y senescentes (2-veces, P<0.01). Las respuestas se bloquearon con JNJ7777120. Podemos concluir que las líneas celulares tumorales mamarias presentan una expresión funcional del RH4, indicando un papel clave en la carcinogénesis mamaria.