La Histamina induce Apoptosis y Senescencia Celular en las C¨¦lulas de Carcinoma Mamario Humano MCF-7.

BRENZONI P; MASSARI N; CARABAJAL E; BERGOC RM; RIVERA ES; MEDINA VA

Buenos Aires, Argentina

Jornada; XXV Jornadas Multidisciplinarias de Oncolog¨ªa, Instituto de Oncolog¨ªa Angel H. Roffo; 2009

Instituto de Oncolog¨ªa Angel H. Roffo

La histamina es una amina biog¨¦nica que juega un papel crucial en la regulaci¨®n de la proliferaci¨®n y diferenciaci¨®n celular durante el desarrollo de la gl¨¢ndula mamaria. Los receptores a histamina H1, H2, H3 y H4 (RH1, RH2, RH3, RH4) se expresan tanto en l¨ªneas celulares como lesiones benignas y malignas derivadas de la gl¨¢ndula mamaria humana. Asimismo, reportamos que la histamina regula diferencialmente procesos biol¨®gicos en c¨¦lulas mamarias normales (HBL-100) y transformadas altamente indiferenciadas (MDA-MB-231). En estas ¨²ltimas, la histamina aumenta la proliferaci¨®n a trav¨¦s del RH3 mientras que la disminuye a trav¨¦s del RH4. En el presente trabajo se investig¨® la acci¨®n de la histamina sobre la regulaci¨®n de la proliferaci¨®n y procesos biol¨®gicos en la l¨ªnea celular m¨¢s diferenciada de c¨¢ncer mamario, MCF-7. Con este prop¨®sito, se investig¨® primeramente la expresi¨®n de los receptores a histamina por RT-PCR e inmunofluorescencia con anticuerpos espec¨ªficos. Por otra parte, se evalu¨® el efecto de la histamina y ligandos espec¨ªficos de los receptores sobre la proliferaci¨®n mediante el ensayo clonog¨¦nico y recuento celular. La apoptosis se determin¨® mediante el ensayo de TUNEL, Anexina-V y el potencial de membrana mitocondrial con el colorante DiOC6. La senescencia se estudi¨® a trav¨¦s de la determinaci¨®n de la actividad de ¦Â-galactosidasa asociada a senescencia. Los resultados indican que la histamina reduce la proliferaci¨®n de las c¨¦lulas MCF-7 en forma dosis dependiente a partir de una concentraci¨®n 0.1 nM. Mediante el uso de agonistas y antagonistas espec¨ªficos, determinamos que la histamina disminuye la proliferaci¨®n principalmente a trav¨¦s de los RH3 (50%) y RH4 (60%). Este efecto inhibitorio sobre la proliferaci¨®n producido por histamina se asocia con la inducci¨®n de apoptosis observ¨¢ndose un aumento significativo del porcentaje de c¨¦lulas Anexina-V positivas (14.6¡À3.4 vs. 5.0¡À0.9), TUNEL-positivas (10.5¡À1.5 vs. 3.6¡À0.5) y una disminuci¨®n del potencial de membrana mitocondrial luego de 72 h de tratamiento. Asimismo, el tratamiento con histamina incrementa el porcentaje de c¨¦lulas senescentes (14.4¡À0.4 vs. 7.8¡À0.5). Los resultados demuestran que los RH3 y RH4 son los principales receptores involucrados en la regulaci¨®n de la proliferaci¨®n, apoptosis y senescencia celular mediada por histamina en las c¨¦lulas MCF-7 siendo ¨¦stos, procesos claves en la carcinog¨¦nesis mamaria.