Papel del óxido nítrico en la inhibición de la proliferación inducida por histamina en células de carcinoma pancreático humano.

CRICCO GRACIELA; GARBARINO GLORIA; GARCIA A; MEDINA VANINA; MOHAMAD NORA; NUÑEZ MARIEL; SAMBUCO LORENA; GUTIERREZ ALICIA; BERGOC ROSA; RIVERA ELENA; MARTIN GABRIELA

29 de noviembre al 2 de diciembre de 2005. Mar del Plata, Argentina.

Congreso; L Reunión Anual de la SAIC, Sociedad Argentina de Investigación Clínica,; 2005

PAPEL DEL OXIDO NÍTRICO EN LA INHIBICIÓN DE LA PROLIFERACIÓN INDUCIDA POR HISTAMINA EN CÉLULAS DE CARCINOMA PANCREÁTICO HUMANO.   Cricco, G; Garbarino, G; García, A; Medina, V; Núñez, M; Mohamad N; Gutiérrez, A; Sambuco, L; Bergoc, R; Rivera, E; Martín, G. La línea celular de carcinoma pancreático sobreexpresa receptores a histamina H1 y H2. La histamina (HA) a través  de los receptores H2 activa la adenilato ciclasa y produce una inhibición de la proliferación. Está descripto que en diversas líneas celulares tumorales el oxido nítrico (NO) media los efectos antiproliferativos. Por otra parte, en células endoteliales la histamina induce la expresión de nitrico sintasa (NOS) y aumenta la producción de NO. El objetivo de este trabajo fue estudiar la posible regulación de la NOS con HA y su acción sobre la proliferación celular. Se evaluó la proliferación celular mediante el método clonogénico. Se observó una inhibición dosis-dependiente del crecimiento tanto en presencia de los inhibidores de la NOS (L-NAME, CE50 = 2±0.5mM); Aminoguanidina, (CE50 = 250±15uM) como del dador de NO (SIN-1, CE50 = 10±3uM). Se estudió la expresión de las isoformas de NOS (endotelial e inducible) por RT-PCR. Observamos que las células PANC-1 expresan eNOS en forma constitutiva y que a las 24 h la eNOS es regulada positivamente por HA 10 uM, forskolina 10 uM (Fk: activador directo de la adenilato ciclasa) y por L-NAME 4 mM. Mientras que se observó una disminución de los niveles de ARNm de la eNOS en presencia de SIN-1 20 uM. La expresión de iNOS resultó indetectable en las mismas condiciones. La determinación de NO por citometría de flujo utilizando el indicador fluorescente diacetato de 4,5diaminofluresceína permitió detectar un aumento significativo del NO intracelular luego de 24hs de incubación con HA (140±13%), Fk (162±18%), L-NAME (153±15%), p< 0.01 vs Control. Se puede concluir que en la línea celular PANC-1 los niveles de NO regulan la transcripción de la eNOS y modulan el crecimiento celular in vitro. Asismismo, los resultados obtenidos indican que el efecto inhibitorio ejercido por la HA sobre la proliferación celular puede ser mediado por los niveles de NO generados en el sistema.     Laboratorio de Radioisótopos, Facultad de Farmacia y Bioquímica. Universidad de Buenos Aires.