Detección de Enterococcus patógenos en aguas ambientales de Salta, Argentina

AGÜERO, E.I.; RAJAL, VERONICA BEATRIZ; HÉCTOR A. CRISTÓBAL

Catamarca

Congreso; XLVI Congreso Argentino de Genética; 2017

El río Arenales atraviesa la ciudad de Salta y recibe el impacto de actividades antrópicas que deterioran su calidad; el contacto con estas aguas representa un riesgo para la salud humana. El objetivo del trabajo fue detectar Enterococcus patógenos en aguas recreativas por PCR en tiempo real (qPCR). Se monitorearon cuatro puntos del río desde abril de 2013 hasta enero de 2014. Dos litros de agua se concentraron por ultrafiltración, se detectaron Enterococcus por cultivo y se extrajo el ADN empleando un kit comercial. A partir de una serie de diluciones del ADN del control positivo se amplificaron los genes de patogenicidad cylA y ace mediante qPCR y se construyeron las curvas estándares. Los genes y cebadores usados fueron seleccionados a partir de la evaluación de cebadores publicados empleando herramientas bioinformáticas. Los recuentos mostraron que la contaminación fue superior a la permitida para aguas recreativas (61 UFC/100 ml) en los puntos analizados. Los resultados de los ensayos in silico (NCBI-primer-Blast) permitieron evaluar los cebadores para ace, con ampliaciones de 517, 499, 688 y 107 pb; y para el gen cylA, con productos de 616, 300, 108 y 94 pb. Los sistemas seleccionados mostraron una eficiencia del 96 y 97% para los genes ace y cylA, respectivamente. De las 36 muestras de aguas concentradas, 14 y 17 fueron positivas para ace y cylA, respectivamente. Los resultados microbiológicos y moleculares confirmaron la contaminación del río. La implementación de marcadores genéticos permite el diagnóstico de la presencia de una cepa patógena en las muestras ambientales.