Genes de resistencia a la tetraciclina en bacterias aisladas del río Arenales en la Provincia de Salta, Argentina

ALICIA CID; POMA, RAMIRO; RAJAL, VERONICA BEATRIZ

Rosario de Santa Fe

Congreso; XXIII Congreso Latinoamericano de Microbiología y XIV Congreso Argentino de Microbiología; 2016

Desde su descubrimiento los antibióticos han reducido sustancialmente la amenaza causada por enfermedades infecciosas. Sin embargo, este progreso se encuentra en riesgo debido a la emergencia y diseminación internacional de bacterias resistentes a antibióticos y de genes de resistencia, que pueden ser transferidos vertical y horizontalmente a otras bacterias mediante diferentes mecanismos. Se han detectado en aguas residuales, en aguas superficiales y en sedimentos, genes de resistencia a antibióticos, incluyendo los genes tet, que otorgan resistencia a tetraciclinas. Se han informado por lo menos 40 genes tet, codificando diferentes mecanismos de resistencia, siendo los genes tet A, B, C, D, E y tet M, O, S, Q, W los más frecuentes en comunidades microbianas acuáticas en todo el mundo.El objetivo de este trabajo fue estudiar la prevalencia de los genes tet A, B, C y E en bacterias que presentan resistencia múltiple a antibióticos, aisladas bajo presión con tetraciclina a partir de una muestra de agua del Rio Arenales (Salta, Argentina).A 57 colonias se les testeó, mediante el método de difusión en agar, su sensibilidad a 9 antibióticos: ciprofloxacina (CIP), ampicilina (AMN), cefalotina (CEP), nitrofurantoina (NIT), ampicilina sulbactama (AMS), trimetoprima-sulfametoxazol (TMS), penicilina (PEN), ácido nalidíxico (NAL) y tetraciclina (TET), la morfología, tinción de Gram, capacidad para fermentar lactosa y presencia de oxidasa.Luego de obtener el ADN genómico por ebullición-enfriamiento de una suspensión bacteriana, se detectaron los genes tet A, B, C, y E por PCR en tiempo real (qPCR) en un StepOne (Applied Biosystems), usando Master Mix Universal KAPA SYBR FAST qPCR Kit (2X) y primers previamente descritos por otros autores.Se encontró que todos los aislados fueron resistentes a por lo menos 4 de los 9 antibióticos testeados. Ningún antibiótico inhibió a todos los aislados; NIT, AMS y CIP fueron los más efectivos ya que sólo el 17,5, 22,8 y 26,3 % de los aislados los resistieron, respectivamente. Todos los aislados resistieron a PEN y TET y un 88,7 % a AMN. Los 57 fueron bacilos o coco-bacilos Gram (-), 50 fermentaron lactosa y carecieron de oxidasa, lo que sugiere que pueden pertenecer a la familia Enterobacteriaceae.Los genes tet B (66,7 %) y A (43,9 %) fueron los más frecuentes. El gen tet E fue detectado en el 12,3 % de los casos, mientras que sólo un aislado presentó el tet C. El 22,8 % de los aislados presentó dos genes, siendo la combinación tet A-tet B la más frecuente. Un aislado fue positivo para tres genes y en dos no se detectó ningún gen de resistencia. Se concluye que el agua puede actuar como un importante reservorio de microorganismos resistentes a los antibióticos, lo que puede contribuir a la aparición y diseminación de genes de resistencia en el ambiente. Resulta preocupante la presencia de bacterias con resistencia múltiple, influyendo en la creciente dificultad mundial para tratar infecciones bacterianas.