INVESTIGADORES
RAJAL Veronica Beatriz
congresos y reuniones científicas
Título:
Aplicación de nuevas técnicas para el diagnóstico de virus de Influenza A en Salta, Argentina
Autor/es:
HUGO R. POMA; VIVIANA RASKOVSKY; ALBERTO GENTILE; VERÓNICA B. RAJAL
Lugar:
Buenos Aires
Reunión:
Congreso; XII Congreso Argentino de Microbiología; 2010
Resumen:
Introducción: Hasta inicios del
año 2009 los virus Influenza que circulaban en nuestro país fueron cepas de
Influenza A subtipos H1N1 y H3N2 estacionales. En el año 2009 surgió un nuevo
virus Influenza A con material genético de diferentes orígenes, al que se lo
llamó Influenza A (H1N1) pandémico. Ante la rápida propagación de esta nueva
especie viral, la Organización Mundial de la Salud declaró la pandemia, lo que
significó un gran desafío a nivel mundial para desarrollar técnicas rápidas,
sensibles y específicas en el diagnóstico que permitieran tomar medidas
sanitarias oportunas.
Objetivo: Realizar el
diagnóstico de Influenza A (H1N1) empleando métodos sensibles, rápidos y
específicos en Salta, Argentina
Materiales y Métodos: Se analizaron
muestras (hisopados y aspirados nasofaríngeos) de pacientes ambulatorios y
hospitalizados, incluyendo todos los grupos etarios, de la provincia de Salta. A
partir de la semana epidemiológica 35 del año 2009 se aplicó la siguiente
metodología de trabajo. Panel de virus respiratorios (Influenza A, Influenza B,
Adenovirus, Virus Sincicial Respiratorio, Parainfluenza Virus) utilizando
técnicas de Inmunofluorescencia indirecta con anticuerpos monoclonales
específicos para cada tipo de virus, según se venía trabajando en años
anteriores en la Unidad Centinela (Hospital del Milagro). La totalidad de las
muestras de las semanas epidemiológicas 35 y 36 fueron también analizadas
mediante RT-PCR en tiempo real (qRT-PCR) para identificación de Influenza A
(H1N1) pandémico. Los ácidos nucleicos fueron extraídos empleando kits
comerciales (Invitrogen) y el protocolo empleado para qRT-PCR fue el publicado
por el Center of Disease Control (USA, Abril 2009). Las actividades se
dividieron coordinadamente en dos estaciones de trabajo: recepción, toma de
muestras y extracción de ácidos nucleicos en Hospital del Milagro y diagnóstico
molecular en Laboratorio de Aguas de la Universidad Nacional de Salta,
empleando un equipo GenAmp Sequence Detection 5700 (Applied Biosystems).
Resultados: De las 157
muestras analizadas en Salta en las semanas epidemiológicas 35 y 36, 141 (89%)
dieron negativas por IFI y 16 (11%) positivas para Influenza A. Por qRT-PCR 74
muestras (47%) dieron positivas para A y en 83 (53%) muestras no se detectó
genoma de Influenza A pandémico. De las 74 muestras positivas para Influenza A,
43 (58%) fueron virus Influenza A (H1N1) pandémico y 31 no se pudieron
subtipificar.
Conclusiones: La aplicación de
qRT-PCR ha resultado exitosa para realizar el diagnóstico del virus de
Influenza A (H1N1) pandémico, permitiendo recuperar un gran porcentaje de
muestras que fueron IFI negativas. El contar con resultados rápidos y específicos permitió
tomar decisiones adecuadas minimizando el impacto en salud pública.