Efecto fotosensibilizante de la Terapia Fotodinámica a partir de ALA sobre una línea endotelial microvascular

RODRIGUEZ L, DI VENOSA G, MAMONE L, CASAS A, BATLLE A.

Mar del Plata, Buenos Aires, Argentina

Congreso; LIII Reunión anual de la SAIC; 2008

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

El efecto fotodinámico corresponde al daño o muerte celular inducido por un fotosensibilizante en presencia de luz y oxígeno y constituye una alternativa terapéutica muy prometedora para el tratamiento de ciertos tumores accesibles por vía endoscópica o superficiales. En este sentido, la terapia fotodinámica (TFD) se está aplicando para el tratamiento de tumores localizados. Un aspecto importante y controvertido de la fotosensibilización es el rol de la vasculatura. Se cree que la destrucción irreversible de la vasculatura del tumor es en parte responsable de la efectividad de la TFD con algunos fotosensibilizantes. Por otra parte, la TFD se ha empleado tanto por su efecto angiogénico como antiangiogénico, pudiendo estas diferencias deberse a las distintas dosis de luz y fotosensibilizante aplicadas. El objetivo del presente trabajo es estudiar la TFD con el precursor del fotosensibilizante Protoporfirina IX, el ácido 5-aminolevúlico (ALA), sobre la línea de células microvasculares endoteliales humanas inmortalizadas HMEC-1. Luego de 3 hs de incubación con ALA el plateau de porfirinas se alcanzó empleando una concentración de ALA de 2 mM, y fue de 1,51 ng porfirinas/105 cél, mientras que a las 24 hs de incubación el plateau de 12,9 ng porfirinas/105 cél se alcanzó empleando una concentración de ALA 1 mM. El plateau en la síntesis de porfirinas en el tiempo se encontró a las 24 hs de incubación con ALA 2 mM. A partir de esto, las condiciones fijadas para realizar la TFD con un banco de tubos fluorescentes fue de 3 hs de incubación con ALA 2 mM. Al otro día de la TFD se evaluó por MTT la respuesta a la terapia, y se vio que la dosis letal 50 de luz fue de 0.048 ± 0.003 J/cm2. Se concluye por la baja dosis de luz necesaria para matar estas células endoteliales, que efectivamente la fotosensibilización de estas jugaría un papel preponderante en la regresión tumoral inducida por la TFD. superficiales. En este sentido, la terapia fotodinámica (TFD) se está aplicando para el tratamiento de tumores localizados. Un aspecto importante y controvertido de la fotosensibilización es el rol de la vasculatura. Se cree que la destrucción irreversible de la vasculatura del tumor es en parte responsable de la efectividad de la TFD con algunos fotosensibilizantes. Por otra parte, la TFD se ha empleado tanto por su efecto angiogénico como antiangiogénico, pudiendo estas diferencias deberse a las distintas dosis de luz y fotosensibilizante aplicadas. El objetivo del presente trabajo es estudiar la TFD con el precursor del fotosensibilizante Protoporfirina IX, el ácido 5-aminolevúlico (ALA), sobre la línea de células microvasculares endoteliales humanas inmortalizadas HMEC-1. Luego de 3 hs de incubación con ALA el plateau de porfirinas se alcanzó empleando una concentración de ALA de 2 mM, y fue de 1,51 ng porfirinas/105 cél, mientras que a las 24 hs de incubación el plateau de 12,9 ng porfirinas/105 cél se alcanzó empleando una concentración de ALA 1 mM. El plateau en la síntesis de porfirinas en el tiempo se encontró a las 24 hs de incubación con ALA 2 mM. A partir de esto, las condiciones fijadas para realizar la TFD con un banco de tubos fluorescentes fue de 3 hs de incubación con ALA 2 mM. Al otro día de la TFD se evaluó por MTT la respuesta a la terapia, y se vio que la dosis letal 50 de luz fue de 0.048 ± 0.003 J/cm2. Se concluye por la baja dosis de luz necesaria para matar estas células endoteliales, que efectivamente la fotosensibilización de estas jugaría un papel preponderante en la regresión tumoral inducida por la TFD. a las 24 hs de incubación el plateau de 12,9 ng porfirinas/105 cél se alcanzó empleando una concentración de ALA 1 mM. El plateau en la síntesis de porfirinas en el tiempo se encontró a las 24 hs de incubación con ALA 2 mM. A partir de esto, las condiciones fijadas para realizar la TFD con un banco de tubos fluorescentes fue de 3 hs de incubación con ALA 2 mM. Al otro día de la TFD se evaluó por MTT la respuesta a la terapia, y se vio que la dosis letal 50 de luz fue de 0.048 ± 0.003 J/cm2. Se concluye por la baja dosis de luz necesaria para matar estas células endoteliales, que efectivamente la fotosensibilización de estas jugaría un papel preponderante en la regresión tumoral inducida por la TFD. se alcanzó empleando una concentración de ALA 1 mM. El plateau en la síntesis de porfirinas en el tiempo se encontró a las 24 hs de incubación con ALA 2 mM. A partir de esto, las condiciones fijadas para realizar la TFD con un banco de tubos fluorescentes fue de 3 hs de incubación con ALA 2 mM. Al otro día de la TFD se evaluó por MTT la respuesta a la terapia, y se vio que la dosis letal 50 de luz fue de 0.048 ± 0.003 J/cm2. Se concluye por la baja dosis de luz necesaria para matar estas células endoteliales, que efectivamente la fotosensibilización de estas jugaría un papel preponderante en la regresión tumoral inducida por la TFD.