Rol de MutS-alpha y MutS-gamma en la reparación de CPDs provocados por la exposición de plantas a la radiación UV-B

LARIO, L.; CASATI, P.; SPAMPINATO, C.

Rosario

Congreso; XIII Reunión Latinoamericana ? XXVII Reunión Argentina de Fisiología Vegetal (SAFV); 2008

Sociedad Argentina de Fisiología Vegetal

Los heterodímeros MutSα (MSH2:MSH6) y MutSγ (MSH2:MSH7) forman parte del Sistema de Reparación de Bases Incorrectamente Apareadas (MMR), cuya función principal es el reconocimiento y remoción de errores que se producen durante la replicación del ADN. Con el objetivo de determinar si este sistema interviene, además, en la reparación de dímeros de pirimidina (CPDs) provocados por la radiación UV-B, se estudiaron los cambios en los niveles de transcriptos de los genes msh2, msh6 y msh7 en plantas expuestas a UV-B mediante RT-PCR en tiempo real. Tanto en hojas de maíz como en flores de Arabidopsis thaliana irradiadas con UV-B se observó una marcada producción de estos genes. Sin embargo, en hojas de Arabidopsis no se detectó la expresión de msh7. Por otra parte, se procedió a la determinación del daño producido al ADN por UV-B en plantas de Arabidopsis homocigotos mutantes por inserción de T-DNA en los genes msh2 y msh6 mediante experimentos de Dot Blot utilizando anticuerpos contra CPDs. Ambas líneas demostraron ser más sensibles a la radiación UV-B con respecto a las plantas salvajes, ya que presentaron un mayor nivel de CPDs al finalizar el tratamiento durante 4 hs con UV-B. Se observó, además, que dichas mutantes, 24 hs después de finalizado el tratamiento con UV-B, presentaron una menor velocidad de reparación del daño, tanto si este período de recuperación ocurría en presencia de luz o en oscuridad. Estos resultados sugieren que, en las plantas, MutSα y MutSγ estarían involucradas en la reparación del daño al ADN por UV-B. MutSγ participaría en la reparación de CPDs de manera tejido-específica según la especie, mientras que MutSα se expresaría en respuesta a UV-B de manera general en distintos tejidos de maíz y Arabidopsis.