INVESTIGADORES
COUTO Alicia Susana
congresos y reuniones científicas
Título:
Síntesis de nuevas moléculas antiparasitarias
Autor/es:
MARYLIN POURCELOT; MALENA LANDONI; ERIC GRAND; ALICIA S. COUTO; VILMA G. DUSCHAK; JOSÉ KOVENSKY
Lugar:
Mendoza -Argentina
Reunión:
Congreso; XVII Simposio Nacional de química Orgánica; 2009
Institución organizadora:
Soc. Argentina de Investigación en Química Orgánica
Resumen:
SINTESIS DE NUEVAS MOLECULAS ANTIPARASITARIAS
Marilyne Pourcelot1, Malena Landoni2, Eric Grand1,
Alicia S. Couto2, Vilma G. Duschak3, José Kovensky11, Malena Landoni2, Eric Grand1,
Alicia S. Couto2, Vilma G. Duschak3, José Kovensky12, Vilma G. Duschak3, José Kovensky1
1. Laboratoire des Glucides UMR 6219, Université de Picardie Jules Verne, 80039 Amiens, Francia
2. CIHIDECAR (CONICET) Departamento de Química Orgánica, Facultad de Ciencias Exactas y Naturales,
Universidad de Buenos Aires, 1428 Buenos Aires, Argentina
3. Instituto Nacional de Parasitología, ANLIS-Malbrán, Ministerio de Salud, Buenos Aires, Argentina
marilyne.pourcelot@u-picardie.fr
La enfermedad de Chagas es una infección parasitaria que afecta a 90 millones
de personas en el continente americano, y sigue siendo de difícil detección dado que
su fase crónica aparece luego de 10 a 20 años de infección silenciosa. En el suero de
pacientes, se encuentran anticuerpos dirigidos contra una glicoproteína del parásito T.
cruzi llamada cruzipaína (Cz). Couto et al.1 han demostrado la presencia de sulfatos
en las cadenas N-glicosídicas de Cz, indispensables para el reconocimiento
antigénico, pero subsisten indeterminaciones sobre el número y de la posición de los
grupo sulfato.
Se sintetizaron conjugados de azúcares sulfatados y una proteína carrier
(BSA), usando dos estrategias: a) el azúcar se trató con carbamato de amonio para
dar una glicosilamina que se acopló directamente a la BSA; b) se introdujo un linker
espaciador de 3 carbonos y un grupo azida, precursor de la amina que permite la
unión a la BSA. El número de unidades de azúcar acopladas se determinó por
MALDI-MS del conjugado.T.
cruzi llamada cruzipaína (Cz). Couto et al.1 han demostrado la presencia de sulfatos
en las cadenas N-glicosídicas de Cz, indispensables para el reconocimiento
antigénico, pero subsisten indeterminaciones sobre el número y de la posición de los
grupo sulfato.
Se sintetizaron conjugados de azúcares sulfatados y una proteína carrier
(BSA), usando dos estrategias: a) el azúcar se trató con carbamato de amonio para
dar una glicosilamina que se acopló directamente a la BSA; b) se introdujo un linker
espaciador de 3 carbonos y un grupo azida, precursor de la amina que permite la
unión a la BSA. El número de unidades de azúcar acopladas se determinó por
MALDI-MS del conjugado.llamada cruzipaína (Cz). Couto et al.1 han demostrado la presencia de sulfatos
en las cadenas N-glicosídicas de Cz, indispensables para el reconocimiento
antigénico, pero subsisten indeterminaciones sobre el número y de la posición de los
grupo sulfato.
Se sintetizaron conjugados de azúcares sulfatados y una proteína carrier
(BSA), usando dos estrategias: a) el azúcar se trató con carbamato de amonio para
dar una glicosilamina que se acopló directamente a la BSA; b) se introdujo un linker
espaciador de 3 carbonos y un grupo azida, precursor de la amina que permite la
unión a la BSA. El número de unidades de azúcar acopladas se determinó por
MALDI-MS del conjugado.N-glicosídicas de Cz, indispensables para el reconocimiento
antigénico, pero subsisten indeterminaciones sobre el número y de la posición de los
grupo sulfato.
Se sintetizaron conjugados de azúcares sulfatados y una proteína carrier
(BSA), usando dos estrategias: a) el azúcar se trató con carbamato de amonio para
dar una glicosilamina que se acopló directamente a la BSA; b) se introdujo un linker
espaciador de 3 carbonos y un grupo azida, precursor de la amina que permite la
unión a la BSA. El número de unidades de azúcar acopladas se determinó por
MALDI-MS del conjugado.
O
HO
OH
NHSO3
-3
-
HO
OH NH4.COONH24.COONH2
MeOH
O
HO
OH
NHSO3
-3
-
HO NH22
BSA, glutaraldehido
buf fer fosfato pH 7,4
N N BSA
O
HO
OH
NHSO3
-3
-
HO
O
HO
OH
NHAc
-O3SO
O N N BSA
O
HO
OH
NHAc
HO
OH
O
AcO
OAc
AcO
N
O CH2Cl2O3SO
O N N BSA
O
HO
OH
NHAc
HO
OH
O
AcO
OAc
AcO
N
O CH2Cl22Cl2
HO(CH2)3N3, CuCl22)3N3, CuCl2
O
AcO
OAc
NHAc
AcO
O N33
O
HO
OH
NHAc
-O3SO
O NH2O3SO
O NH22
a)
b) i. SO3.Py, DMF
ii. H2/Pd-C
i. Ac2O, Py
ii. TMSOTf
BSA, glutaraldehido
buffer fosfato pH 7,4i. SO3.Py, DMF
ii. H2/Pd-C
i. Ac2O, Py
ii. TMSOTf
BSA, glutaraldehido
buffer fosfato pH 7,42/Pd-C
i. Ac2O, Py
ii. TMSOTf
BSA, glutaraldehido
buffer fosfato pH 7,42O, Py
ii. TMSOTf
BSA, glutaraldehido
buffer fosfato pH 7,4
Por inmunización de ratones con la proteína nativa, se obtuvo un suero anti-Cz
que reconoce moléculas sulfatadas, mientras que las mismas estructuras no
sulfatadas no son reconocidas. Los resultados preliminares indican una respuesta
creciente en función del contenido en sulfato. Estos estudios muestran la importancia
de los grupos sulfato en la inmunoreactividad de la glicoproteína de T. cruzi, permitiría
el desarrollo de un método de detección de la enfermedad de Chagas.T. cruzi, permitiría
el desarrollo de un método de detección de la enfermedad de Chagas.
1. M. Barboza, V. G. Duschak, Y. Fukuyama, H. Nonami, R. Erra-Balsells, J. J. Cazzulo, A. S. Couto. Febs
J., 2005, 3803-3815.
Se agradece el financiamiento de ECOS-Sud (A06S01) Argentina-Francia para el intercambio de
investigadores y doctorandos.Febs
J., 2005, 3803-3815.
Se agradece el financiamiento de ECOS-Sud (A06S01) Argentina-Francia para el intercambio de
investigadores y doctorandos., 2005, 3803-3815.
Se agradece el financiamiento de ECOS-Sud (A06S01) Argentina-Francia para el intercambio de
investigadores y doctorandos.Sud (A06S01) Argentina-Francia para el intercambio de
investigadores y doctorandos.