Aplicaciones de la espectrometría de masa MALDI-TOF a la determinación estructural de lípidos.

ADRIANA C. CASABUONO; MALENA LANDONI; TAMARA PIÑERO ; ALICIA S. COUTO

Buenos Aires

Jornada; V Jornadas de Bioquímica y Biología Molecular de Lípidos y Lipoproteínas; 2012

Desde hace unos años nuestro laboratorio se ha centrado en el estudio estructural de esfingolípidos y lipopolisacáridos de diferentes parásitos y bacterias. Dado que actualmente la espectrometría de masa MALDI-TOF (matrix assisted laser desorption ionization- time of flight) es uno de los métodos más apropiados para el análisis de lípidos hemos utilizado esta metodología para el análisis de diferentes tipos de compuestos. Los lipopolisacáridos tienen una estructura común en todas las bacterias Gram-negativo, están compuestos por un disacárido de diglucosamina acilada y en general fosforilada denominado Lípido A al que se une una cadena de hidratos de carbono que varía en tamaño. En este trabajo se describirá el estudio de los lípidos A purificados a partir de lipopolisacáridos aislados de cepas salvajes de diferentes bacterias (Xanthomonas axonopodis pv. citri, Bordetella bronchiseptica, Shigella flexneri) y en algunos casos se compararán las estructuras con las aisladas de cepas mutantes. Por otra parte, durante el estudio estructural de glicoesfingolipidos y sulfátidos aislados de Plasmodium falciparum y Trypanosoma cruzi se desarrollaron en nuestro laboratorio dos aplicaciones en la que se utilizan los esfingolípidos unidos covalentemente a grupos fluorescentes donde este mismo grupo actúa como fotosensibilizador permitiendo el análisis directo por espectrometría de masa MALDI. Estas metodologías resultan particularmente útiles ya que permiten la localización y caracterización de metabolitos en un único experimento, disminuyendo los tiempos de análisis y aumentando la sensibilidad y versatilidad con un mínimo de preparación de muestra.