Derivados del ácido 5-aminolevulínico en el tratamiento fotodinámico del cáncer diseminado de ovario: modelos in vitro e in vivo

CRISTIAN G ORLANDO; MARIELA CÉSPEDES, GUSTAVO CALVO, GABRIEL GOLA, JAVIER RAMÍREZ, GABRIELA DI VENOSA, DANIEL SÁENZ, ADRIANA CASAS

Congreso; 17mo Congreso Internacional de Medicina Interna del Hospital de Clínicas; 2018

Objetivos: La Terapia Fotodinámica (TFD) es un tratamiento para tumores de acceso endoscópico, como el cáncer de ovario, que se basa en la acumulación de un fotosensibilizante en el tumor y la posterior irradiación con luz visible, lo cual genera especies reactivas de oxígeno que son tóxicas para las células. La Protoporfirina IX es un fotosensibilizante biosintetizado a partir del ácido 5-aminolevulínico (ALA). En el caso del cáncer de ovario en estadío de diseminación peritoneal, se propone el uso de la TFD intraperitoneal, accediendo con la luz a través de una fibra óptica. Dado que el ALA es una molécula hidrofílica y por ende, de difícil incorporación a las células, estamos sintetizando nuevos derivados del mismo que entren con más facilidad a la totalidad de las células blanco. El uso demodelos 3D en cáncer no sólo propone un escenario más realista que el cultivo de células en monocapa, sino que además en el cáncer de ovario, representa un modelo muy similar al de las micrometástasis presentes durante la diseminación peritoneal. Dentro de los modelos 3D se encuentran los esferoides como modelos de metástasis, y las oncosferas que son estructuras enriquecidas en células madre tumorales. El objetivo del trabajo es estudiar la respuesta diferencial de células de cáncer de ovario a la TFD con ALA, y sus derivados lipofílicos , en cultivos 2D, 3D y en modelos animales.Materiales y Métodos: Se emplearon cultivos celulares en monocapa (2D) de células humanas de ovario IGROV-1 y SKOV-3, a partir de los cuales se generaron a) esferoides mediante el método de gota pendiente, y b) oncoesferas por exposición de las células a medio sin suero suplementado con factores de crecimiento en placas de baja adhesión. Luego de exponer los cultivos al ALA o sus derivados y ser iluminados, se cuantificó la viabilidad por MTT. Se inyectaron intraperitonealmente ratones atímicos N:NIH (S)-Fox1nu con células SKOV-3 de manera de inducir un modelo de carcinomatosis peritoneal y luego de 40 diás de crecimiento se inyectaron intraperitoneal (ip) con ALA o sus derivados y se extrajo la Protoporfirina IX la cual se cuantificó fluormétricamente.Resultados: Los cultivos tanto de esferoides de SKOV-3 como de oncoesferas de la línea IGROV-1 mostraron una mayor resistencia luego de la TFD empleando ALA o derivados, y no se observaron diferencias significativas en la supervivencia post TFD entre los derivados del ALA y el ALA mismo. Luego de la administración de ALA y sus derivado 89ALA y 95ALA por vía ip a ratones portadores de carcinomatosis de ovario perioneal, se comprobó que el 95ALA fue tóxico por lo cual se continuaron los estudios con el 89ALA. El 89ALA demostró ser altamente selectivo por el tejido tumoral de ovario, observándose por fluorescencia una alta concentración de Protoporfirina IX, siendo la acumulación de la misma en piel ?a diferencia del ALA? muy escasa, lo cual resulta ventajoso por disminuir la fotosensibilidad cutánea inducida por la administración sistémica de ALA. El resto de los órganos, excepto el intestino, no acumuló Protoporfirina fotosensibilizante a partir del 89ALA.Conclusiones: El uso de derivados de ALA mejora la eficacia de la TFD en un modelo in vivo de carcinomatosis peritoneal de ovario, por lo cual podemos vislumbrar su potencial para el uso en la Terapia Fotodinámica intraperitoneal. Los modelos 3D de cáncer de ovario son útiles ya que reflejan la mayor resistencia a la TFD que se observaría en los modelos in vivo.