Determinación de metotrexato y leucovorin en orina mediante calibración de cuarto orden aplicando análisis paralelo de factores y cuadrados mínimos trilineales

OLIVIERI, A. C.; ARANCIBIA, J. A.; MUÑOZ DE LA PEÑA, A.; DURÁN MERÁS, I.; ESPINOSA MANSILLA, A.

Olavarria, Prov. de Buenos Aires

Congreso; XXV Congreso Argentino de Química; 2004

En los últimos años se introdujeron, con el propósito de resolver mezclas de componentes o un único componente en muestras complejas, nuevas técnicas quimiométricas multi-dimensionales. Muchos de estos métodos son de segundo orden y están basados en matrices de excitación-emisión de fluorescencia (MEE). Los métodos multi-dimensionales pueden englobarse en tres grupos principales: 1) solución directa, 2) iterativos y 3) cuadrados mínimos. Los algoritmos iterativos han sido los más ampliamente utilizados debido a que se los considera menos sensibles al ruido instrumental y a desviaciones del modelo. Los más usados son el análisis paralelo de factores (PARAFAC) y la descomposición trilineal autoponderada (SWATLD), particularmente cuando los datos siguen el llamado modelo trilinear. Los experimentos cinéticos permiten introducir una dimensión temporal en la medida de los datos, permitiendo el aumento de la selectividad de la determinación. Se han informado en la literatura medidas cinéticas de tres dimensiones siguiendo la evolución de espectros de absorción o emisión. Sin embargo, en unos pocos casos se realizaron medidas de la evolución cinética de MEE para implementar una calibración. En este trabajo analizaremos datos cinéticos de fluorescencia de cuatro dimensiones para un sistema compuesto por una combinación de los antineoplásicos metotrexato y leucovorin en orina humana. El metotrexato (MTX) es una droga utilizada en terapia de tumores sólidos y leucemias, entre otras indicaciones. La toxicidad intrínseca de las terapias con altas dosis de MTX requiere su monitoreo en plasma y suero y la coadministración de ácido folínico (LV), el cual se utiliza como agente de rescate. La determinación simultanea de MTX y LV presenta varias dificultades experimentales. Una propiedad interesante es que ambos analitos pueden ser trasformados por oxidación con H2O2 o KMnO4 en productos altamente fluorescentes. Las propiedades luminiscentes de estos productos fueron estudiadas anteriormente y se realizaron dos métodos cinético-fluorescentes separados, basados en la oxidación a diferentes valores de pH. La cinética de estas reacciones, previamente estudiadas por nuestro grupo de trabajo, forman la base de la presente metodología para la generación de datos de cuatro dimensiones. La reacción de los analitos con KMnO4 se siguió midiendo la evolución de las MEE, utilizando por primera vez para este fin un espectrofluorómetro comercial y finalmente a estos datos se le aplicaron los modelos PARAFAC y TLLS.