Interacción proteína-alcaloide. Estudios Espectroscópicos

C. I. CÁMARA; O. R.CAMARA; F. Y. OLIVA

Buenos Aires

Congreso; Interacción proteína-alcaloide. Estudios Espectroscópicos; 2011

Sociedad Argentina de Biofísica

La Albúmina Sérica Humana (ASH) es la principal proteína plasmática que interacciona con un amplio espectro de compuestos debido a su flexibilidad conformacional y a la gran variedad de sitios de unión que se encuentran en sus dominios. Entre los compuestos que se unen a la ASH se encuentran los iones orgánicos hidrofóbicos de tamaño medio (100-600Da). La boldina, alcaloide hidrofóbico que se encuentra en la hoja del arbusto de boldo, es un compuesto que puede unirse a la ASH en sus bolsillos hidrofóbicos. Entre los aminoácidos componentes de la ASH se encuentran 18 tirosinas y un triptofano, principales grupos cromóforos de esta proteína y sensores de cambios conformacionales. El objetivo principal de este trabajo es analizar el efecto de condiciones experimentales, tales como pH y fuerza iónica, en el desarrollo de carga, en la estructura de la proteína ASH y en su influencia en la interacción con la boldina, efectos que fueron evaluados mediante el uso de técnicas espectroscópicas. En primera instancia se analizó el comportamiento UV-visible, tanto de ASH como de boldina, ante el cambio de pH del medio. En ambos casos se observó un corrimiento hipsocrómico con el incremento del pH. Posteriormente se estudió la interacción entre boldina y ASH, en distintas relaciones molares, principalmente a través de espectroscopia UV-visible y espectroscopia de fluorescencia. El espectro UV-visible del sistema proteína-boldina no mostró una variación importante a medida que se aumenta la concentración de boldina, lo cual es indicativo de que la interacción ASH-boldina no altera la conjugación inter-anillo y su resonancia extendida. En tanto que los estudios del sistema mediante espectroscopía de fluorescencia, revelan un proceso de quenching entre ambas moléculas a relaciones molares bajas. Es posible afirmar que la interacción boldina-ASH no afecta la conjugación de los anillos aromáticos, pero si se puede proponer un quenching dinámico, cuyas constantes son del orden de 106M, en diferentes condiciones de pH.