Diseño, síntesis y aplicaciones de análogos del sustrato de la enzima farnesil trasferasa

LABADIE, GUILLERMO R.; POULTER, C. DALE

Mar del Plata, Bs. As.

Conferencia; XV SINAQO (Simposio Nacional de Química Orgánica); 2005

SAIQO - Sociedad Argentina de Investigación en Química Orgánica

La enzima farnesil tranferasa (PFT) cataliza la reacción de transferencia de un grupo farnesilo al tiol de una cisteína de un motivo CAAX ubicado en el C-terminal de diversas enzimas. Dentro de distintos procesos post-traduccionales, la farnesilación dirige las proteínas hacia la membrana celular en celulas eucariotas.1 Debido a la importancia que estos procesos presentan como blanco terapéutico y en procesos de señalización es que nos propusimos como objetivo preparar sustratos de esta enzima, que posean distintos grupos funcionales en la posición omega susceptibles de posteriores modificaciones. Basándonos en la experiencia adquirida en nuestro laboratorio y en diversos trabajos reportados en la literatura, diseñamos una serie de azido y propargil derivados de farnesil difosfato como posibles sustratos de la PFT. Los grupos funcionales elegidos se fundamentaron en que las azidas han sido exitosamente utilizadas en sistemas biológicos mediante la ligación de Staudinger introducida recientemente por Bertozzi.2 Por otro lado, los alquinos terminales, han sido eficientemente aplicados en reacciones de Huigen catalizadas con Cu(I), modificación introducida por Sharpless y aplicada con éxito en sistemas biológicos.3 Diferentes azido y propargil derivados fueron preparados, preservando dos unidades isoprenoides para garantizar que los compuestos fueran reconocidos por la enzima. Luego fueron ensayados con la enzima de levadura, utilizando un péptido sintético como sustrato, encontrando que varios de ellos se comportaban como tales. Posteriormente los productos enzimáticos fueron caracterizados y los parámetros cinéticos determinados. Con estos sustratos disponibles, se discutirán las aplicaciones de los mismos en la modificación química y el marcado con sondas fluorescentes de proteínas. Referencias 1- a) Winter-Wann, A.M. and Casey, P.J. Nature. Rev. Cancer 2005, 5, 405-12 b) Harris, C. M.; Poulter, C. D. Nat. Prod. Rep. 2000, 17, 137-144. 2- Saxon, E.; Bertozzi, C. R. In Science 2000; 287, 2007-2010. 3- Wang, Q.; Chan, T. R.; Hilgraf, R.; Fokin, V. V.; Sharpless, K. B.; Finn, M. G. J. Am. Chem. Soc. 2003, 125, 3192-3193.