La exocitosis de gránulos corticales en ovocitos de ratón está mediada por rab3a

CARABAJAL, MARIANELA; LÓPEZ, CECILIA; MAYORGA, LUIS S; MICHAUT, MARCELA A

Mendoza

Jornada; XXI Jornadas de Investigación de la Universidad Nacional de Cuyo; 2007

Secretaría de Ciencia, Técnica y Posgrado. Universidad Nacional de Cuyo

La exocitosis de Gránulos Corticales (GC) en el ovocito es uno de los primeros signos de la activación embrionaria que ocurre luego de la fertilización, previniendo la poliespermia. Si bien la inducción de esta exocitosis depende de la movilización del calcio intracelular, se desconoce cuál es la vía de transducción de señales activada por el calcio. Rab3A, una GTPasa pequeña, ha sido implicada en la exocitosis regulada por calcio. En ovocitos de ratón, Rab3A se distribuye específicamente en la región cortical donde se localizan los GC, sin embargo se desconoce si Rab3A participa en la exocitosis de GC. Para investigar el efecto de Rab3A en esta exocitosis, diseñamos una Rab3A permeable a membranas agregando un péptido de poliarginina (R) al extremo N-terminal de Rab3A (R-Rab3A). Los ovocitos maduros fueron extraídos de hembras superovuladas e incubados en presencia del ionóforo de calcio A23187 o de R-Rab3A. Luego, los GC fueron fijados, teñidos con Lens Culinaris Agglutinin-FITC y cuantificados por microscopía confocal usando el programa Image J. Nuestros resultados muestran que R-Rab3A estimula la exocitosis de los GC en la misma magnitud que el ionóforo de calcio A23187, indicando que Rab3A participa en la exocitosis de GC en ovocitos maduros de ratón.