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Fisiológicamente, las células de los túbulos colectores medulares renales se encuentran inmersas en un intersticio que posee la osmolaridad más alta del organismo. Esta elevada osmolaridad está estrechamente relacionada con la función de la médula renal de llevar a cabo la concentración final de la orina para mantener la homeostasis hídrica y electrolítica del organismo. Así, Las células epiteliales tubulares habitualmente están expuestas a concentraciones altas y variables de NaCl y urea que, dependiendo del estado de diuresis de un individuo, pueden llegar hasta 500 y 1000mM, respectivamente. Para enfrentar este entorno adverso las células han desarrollado mecanismos de protección y adaptación que involucra, entre otros, el aumento en el metabolismo lipídico para mantener la homeostasis de las membranas celulares y la expresión de numerosos genes osmoprotectores. Este aumento abrupto en la síntesis de proteínas podría causar una sobrecarga proteica en el retículo endoplasmático lo que llevaría a lo que se conoce como estrés del retículo endoplásmico. Trabajos previos en nuestro laboratorio han demostrado que cambios en la hiperosmolaridad ambiental induce la expresión de marcadores de estrés de retículo como CHOP y XBP1 en cultivos de células MDCK. XBP1 es un factor de transcripción que regula la expresión de varios genes lipogénicos lo que conlleva a un aumento en la biogénesis de membranas y que podría participar del mecanismo aliviador del estrés de retículo gracias a la expansión de las membranas de dicho compartimiento. Por otro lado, ha sido descripto que XBP1 puede regular la expresión de genes en forma independiente a la activación de estrés de retículo.El objetivo del presente trabajo fue evaluar si XBP1 participa en la regulación de los genes lipogénicos en células renales sometidas a estrés hiperosmolar. Para ello se cultivaron células MDCK en condiciones de isosmolaridad (control, 298 mOsm/KgH2O) e hiperosmolaridad (NaCl 125mM, 512 mOsm/KgH2O) en ausencia o en presencia de un inhibidor de la vía del XBP1, 4µ8C, o en células tratadas con un siRNA silenciador de la expresión de la proteína XBP1. Luego de 24 h de tratamiento se evaluó la incorporación de 14C-glicerol a los fosfolípidos (FLs), los triglicéridos (TGs) y el intermediario de síntesis diacilglicerol (DGs), como parámetro de síntesis de novo, así como la expresión de las enzimas que participan de esta vía por medio de la técnica de RT-PCR. El tratamiento con medio hiperosmolar causó un aumento significativo en la biosíntesis de las tres especies lipídicas. En estas condiciones, también se encontró incrementada la forma madura del mRNA de XBP1 (s-RNA), lo que conlleva a un aumento en su traducción obteniendo una mayor cantidad de este factor de transcripción XBP1,. El tratamiento de las células con 4µ8C, inhibidor de la actividad de RNAsa asociada a IRE1, disminuyó la biosíntesis de TGs en forma dependiente de la concentración; concomitantemente se observó una acumulación en la radioactividad asociada al DG. Sin embargo, no se observaron cambios en la radioactividad asociada a los FLs. Un efecto similar se observó cuando las células fueron tratadas con el silenciador de XBP1. Cuando se analizó la expresión de enzimas lipogénicas, se encontró disminuido el mRNA de las enzimas DGAT2 y de la Lipina 2. En conjunto estos resultados indican que la hiperosmolaridad induce la activación del factor de transcripción XBP1 el cual participa de la regulación la síntesis de lípidos en las células epiteliales de estirpe renal, y evidencian la relevancia de XBP1 que a través de este mecanismo podría estar ejerciendo un efecto osmoprotector.

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