Análisis de la dinámica del crecimiento axonal en células ganglionares

SALIERNO M; IZZO F; ORTALLI AL; SCICOLONE G; ETCHENIQUE R

Huerta Grande, Córdoba

Taller; X Taller Argentino de Neurociencias; 2008

Taller Argentino de Neurociencias

Realizamos el seguimiento de crecimiento axonal de celulas ganglionaresen explantos de retina durante las primeras 24 horas de cultivo. Estosexplantos tomados de pollos prenatales del dia 7, desarrollan axones quecomienzan a verse despues de 9 horas de cultivo. Dada su caracteristicade crecimiento en este tipo de cultivos dividimos los estados del axon endinamicos positivos, dinamicos negativos y estaticos. En los periodosdinamicos positivos vimos que la velocidad de crecimiento tiene unavariabilidad menor al 16,7% y entre cultivos si bien la variabilidad aumentaa un 21,9% pudimos calcular una velocidad promedio de 3,3 um/h +/- 0,7um/h. Tambien observamos una alta dependencia de la temperatura, por loque estos cultivos se realizaron a 37,4 oC +/-0,2 oC controlados en todomomento.El setup tambien permite el ingreso de una micropipeta para laliberacion focal de drogas mediante pulsos generados por un picospritzer ypuede regularse en un radio menor a los 100um por lo que podemoscontrastar el analisis con axones control en el mismo explanto en lugaresdel campo que no son afectados por la droga. De esta manera, pudimosanalizar moleculas solubles que varian la dinamica en el crecimiento. Enadelante, probaremos factores que varien la velocidad de crecimientoaxonal para analizar como estos 3 estados dinamicos se modifican yanalizaremos la interaccion entre moleculas solubles y en sustrato.