Drogas tricíclicas reposlcionadas como agentes anti-Trypanosoma cruzi via inhibición del transporte de poliaminas

REIGADA, CHANTAL; VALERA-VERA, EDWARD; SAYE, MELISA; GAUNA, LUCRECIA; MIRANDA, MARIANA; PEREIRA, CA

CABA

Jornada; XV Jornadas Científicas del Instituto de Investigaciones Médicas A. Lanari; 2018

Instituto de Investigaciones Médicas A. Lanari

La enfermedad de Chagas, producida por el Trypanosoma cruzi, representa una parasitosis de gran impacto en la salud pública de América Latina. Existen dos fármacos aprobados para su tratamiento, nifurtimox y benznidazol, pero su uso está asociado a efectos adversos de diversa gravedad, siendo importante el desarrollo de nuevas alternativas terapéuticas contra esta afección. Nuestro laboratorio encontró en el parásito una familia de transportadores de aminoácidos y poliaminas denominada TcAAAP (Amino Acid/Auxin Permeases). Los mismos son buenos candidatos como blancos terapéuticos contra esta enfermedad puesto que se encuentran ausentes en mamíferos y median el ingreso de metabolitos, algunos indispensables para la supervivencia del parásito. Dentro de esta familia identificamos y caracterizamos una permeasa de poliaminas denominada TcPAT12. Las poliaminas son moléculas esenciales para el metabolismo de T. cruzi, cuyo transporte es la única vía de obtención de las mismas, debido a que el parásito es incapaz de sintetizarlas de novo. Además, demostramos que la inhibición de este proceso afecta la viabilidad de los parásitos. Recientemente encontramos que un análogo de poliaminas denominado Ant4, diseñado para el tratamiento contra el cáncer, inhibe el transporte de poliaminas en T. cruzi y también tiene actividad tripanocida con un alto efecto sobre tripomastigotes (forma infectiva en mamíferos), con valores de IC50 en el rango nanomolar. En el presente trabajo, identificamos dos drogas antichagásicas, usando el TcPAT12 como blanco para el reposicionamiento de drogas mediante el empleo de técnicas in silico e in vitro. Con el objetivo de encontrar inhibidores del TcPAT12, inicialmente realizamos un rastreo virtual por similitud estructural de ligandos en una base de datos de drogas aprobadas por la FDA (Food and Drug Administration) y usando como molécula de referencia el Ant4. Los candidatos seleccionados por este modelo fueron sometidos a un segundo rastreo basado en el receptor o docking molecular, usando como blanco un modelo tridimensional del TcPAT12. De los compuestos obtenidos, seleccionamos tres fármacos tricíclicos para los ensayos experimentales: los antipsicóticos levopromazina y clorpromazina, y el antidepresivo clomipramina. Demostramos que estos dos últimos medicamentos inhibieron el transporte de poliaminas en epimastigotes (estadio presente en el vector de T. cruzi). Los valores de IC50 calculados para clorpromazina fueron de 17,97 µM para putrescina y 24,62 µM para espermidina. En cambio, clomipramina solo inhibió el transporte de putrescina con una IC50 de 43,39 µM. Ambas drogas presentaron actividad tripanocida en el estadio tripomastigote, con una IC50 de 1,65 µM para clorpromazina y de 4,71 µM para clomipramina, mientras que en epimastigotes los valores de IC50 fueron significativamente mayores, de 50,82 y 49,43 µM, respectivamente; estos datos son importantes ya que solo los estadios de T. cruzi en mamíferos son relevantes desde una perspectiva terapéutica. En conclusión, estos resultados sugieren que la clorpromazina y la clomipramina son drogas prometedoras para el tratamiento de la enfermedad de Chagas debido a que mostraron un potente efecto tripanocida al inhibir el transporte de poliaminas. Además, estos fármacos se encuentran en el mercado, ampliamente utilizados en humanos, por lo que podría reducir considerablemente los requisitos para su posible aplicación como drogas antichagásicas.