Trypanosoma cruzi: Evidencias bioinformáticas y bioquímicas del transporte de riboflavina.

BALCAZAR, DARIO; BONOMI, HERNAN; PEREIRA, CA; GOLDBAUM, FERNANDO; CARRILLO, CAROLINA

Guayaquíl

Congreso; Congreso Latinoamericano de Parasitología FLAP 2013; 2013

FLAP

Introducción La riboflavina es una vitamina (B2) esencial, precursora de las flavinas FMN y FAD, quienes actúan como cofactores de diversas flavoproteínas involucradas en numerosos procesos biológicos. Plantas, hongos y procariotas sintetizan riboflavina de novo mientras que los metazoos, sólo la adquieren por la dieta. Recientemente se identificaron los primeros transportadores específicos en células eucariotas y microorganismos. En este trabajo decidimos estudiar el metabolismo de la riboflavina en Trypanosoma cruzi, evaluando su capacidad de síntesis y transporte. Materiales y métodos Realizamos una búsqueda in silico en el genoma de T. cruzi para identificar secuencias homólogas a genes ya descriptos asociados a biosíntesis o transporte de riboflavina. Además, evaluamos el rol de la riboflavina en la proliferación de T. cruzi, cepa Y. Para ello realizamos curvas de crecimiento con epimastigotes utilizando concentraciones crecientes de riboflavina o diversos análogos. Finalmente, medimos incorporación de 3H-riboflavina en epimastigotes. Resultados En el proyecto genoma de T. cruzi no se anotaron genes relacionados a la biosíntesis o transporte de riboflavina. Sin embargo, pudimos identificar un putativo transportador de riboflavina homólogo a MCH5 de Saccharomyces cerevisiae. La proliferación de epimastigotes disminuyó de forma dosis dependiente tanto con concentraciones subóptimas de riboflavina como con diversos análogos. Ensayos de transporte mostraron que los parásitos incorporan riboflavina y se pudieron determinar las velocidades iniciales, siendo los valores obtenidos similares a los reportados para transportadores de otros organismos. Conclusiones Nuestros resultados sugieren que la riboflavina es esencial para la proliferación de T. cruzi. El parásito carecería de la ruta de biosíntesis y dependería exclusivamente de su incorporación. El transportador putativo identificado es sustancialmente diferente a los de mamíferos y su inhibición o utilización para transportar análogos tóxicos constituiría un blanco para el desarrollo de nuevas moléculas tripanocidas.