Estudio del transportador de prolina de Trypanosoma cruzi.

SAYE, MELISA; CAMARA, MARIA DE LOS MILAGROS; MIRANDA, MARIANA; PEREIRA, CA

Buenos Aires

Jornada; I Jornadas de doctorandos y estudiantes avanzados de CyT de la UNQ; 2013

Universidad Nacional de Quilmes

En tripanosomátidos la prolina es un aminoácido que reviste particular importancia, hace décadas se conoce que constituye una fuente de carbono alternativa a la glucosa [1]. En Trypanosoma cruzi se demostró que la prolina es la fuente de carbono que sustenta la invasión celular en tripomastigotes metacíclicos y la progresión del ciclo intracelular en el pasaje de epimastigotes intracelulares a tripomastigotes [2]. En otros organismos se pudo establecer que la acumulación de prolina intracelular constituye un mecanismo de defensa contra el estrés oxidativo [3,4]. En este trabajo pudimos identificar un transportador de prolina (TcAAP1) perteneciente a la familia de permeasas denominada TcAAAP (Amino Acids/Auxin Permeases). Mediante ensayos de complementación utilizando levaduras mutantes en la permeasa general de aminoácidos (gap1) y el transportador de prolina (put4), se pudo determinar que el gen TcAAP1 permite a las levaduras crecer en un medio mínimo utilizando prolina como única fuente de nitrógeno. En ensayos de transporte de prolina, se determinó que los parásitos que sobre-expresan dicho transportador incorporan hasta un 50% más de este aminoácido. Se realizaron ensayos de localización subcelular y se observó que este transportador se encuentra ubicado en el bolsillo flagelar, una región de elevado intercambio con el medio extracelular. [1] Sylvester D y Krassner SM (1976). ?Proline metabolism in Trypanosoma cruzi epimastigotes?. Comparative Biochemestry and Phisiology; Volumen 55B: Páginas 443-447. [2] Tonelli R, Silber A, Almeida de Faria M, Hirata I, Colli W y Alves MJ (2004). ?L-Proline is essential for the intracelular differentiation of Trypanosoma cruzi?. Cellular Microbiology; Volumen 6, Asunto 8; Páginas 733-741. [3] Krishnan N, Dickman M y Becker D (2008). ?Proline modulates the intracellular redox environment and protects mammalian cells against oxidative stress?. Free Radical Biology and Medicine; Volumen 44, Asunto 4: Páginas 671?681. [4] Natarajan SK, Zhu W, Liang X, Zhang L, Demers A, Zimmerman M, Simpson M y Becker D (2012). ?Proline dehydrogenase is essential for proline protection against hydrogen peroxide-induced cell death?. Free Radical Biology and Medicine; Volumen 53, Asunto 5: Páginas 1181-1191.