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En tripanosomátidos la prolina es un aminoácido que revisteparticular importancia, desde hace décadas se conoce queconstituye una fuente de carbono alternativa a la glucosa yrecientemente se le han asignado nuevos roles metabólicos. En Trypanosoma cruzi se demostró que la prolina es la fuentede carbono que sustenta la invasión celular en tripomastigotesmetacíclicos y la progresión del ciclo intracelular en el pasajede epimastigotes intracelulares a tripomastigotes. Por otrolado, se pudo establecer que la acumulación de prolina libreintracelular constituye un mecanismo de defensa contra elestrés oxidativo. Esta acumulación está determinada fundamentalmentepor la relación entre la degradación, biosíntesisy transporte de este aminoácido. En este trabajo pudimosidentificar un transportador de prolina (TcAAP1) pertenecientea la familia de permeasas denominada TcAAAP (Amino Acids/Auxin Permeases). Esta proteína de 476 aa posee 9-10 pasosde transmembrana predichos, con un extremo N-terminalvariable de 90 aa, siendo esta estructura similar al resto delos miembros de esta familia. Mediante ensayos de complementaciónutilizando levaduras mutantes en la permeasageneral de aminoácidos (gap1) y el transportador de prolina(put4), se pudo establecer que el gen TcAAP1 permite alas levaduras crecer en un medio mínimo utilizando prolinacomo única fuente de nitrógeno. En ensayos de transportede prolina, se determinó que las levaduras transformadascon TcAAP1 poseían una tasa de incorporación de esteaminoácido un orden de magnitud mayor a los controles.Por último, se construyó un modelo de epimastigotes de T.cruzi que sobre-expresa TcAAP1 con un ?tag? tri-Flag en suextremo N-terminal. Este modelo será utilizado tanto para ladeterminación de la localización subcelular de la permeasa,como así también para ensayos de diferenciación in vitro yresistencia a estrés oxidativo.

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