En busca de nuevas funciones de la NDPK1 de Trypanosoma cruzi

PEREIRA, CA; DI GIROLAMO, FABIO; SAYE, MELISA; CAMARA, MARIA DE LOS MILAGROS; MIRANDA, MARIANA

CABA

Jornada; XXV Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Protozoolgía y Enfermedades Parasitarias (SAP); 2012

SAP

Las nucleósido difosfato quinasas (NDPK) son enzimasque cumplen un importante rol en el balance intracelularde nucleótidos mediante la transferencia de fosfatos de altaenergía entre nucleósidos trifosfato y difosfato. Además,están asociadas a numerosos procesos biológicos, razón porla cual son consideradas enzimas multifuncionales. AlgunasNDPKs de organismos patógenos son secretadas y actúancomo factor de virulencia. La TcNDPK1 es una NDPK delparásito Trypanosoma cruzi atractiva para su estudio puestoque resultados previos indican que se une a secuencias deADN, tiene actividad nucleasa y participa en mecanismosde resistencia a drogas tripanocidas que generan daño almaterial genético. A su vez, si bien presenta una localizaciónprincipalmente perinuclear cuando es fusionada a la proteínaGFP y expresada en parásitos produce gránulos que podríanestar vinculados con la naturaleza hexamérica de la NDPKy la dimerización de la proteína reportera. En el presentetrabajo profundizamos el estudio de la formación de dichosgránulos mediante la generación de mutantes y encontramosque mutaciones que afectan la actividad de la enzima (T93Ay H117N) no alteran la formación de los gránulos mientrasque una mutación que impide dimerizar a la GFP (A206K)si lo hace. Actualmente, estamos construyendo una mutante que desestabiliza la estructura cuaternaria de la NDPK y quenos permitirá comprender más sobre este fenómeno. Esprobable que estos gránulos ocurran dentro de las célulascomo parte del funcionamiento normal de la NDPK y que semagnifiquen debido a la fusión. Por otro lado, exploramos laposible secreción de la enzima y su posible rol como factorde virulencia. Encontramos que TcNDPK1 es secretadapor epimastigotes de T. cruzi en condiciones normales decultivo. Todos estos resultados sugieren que la TcNDPK1 esuna enzima multifuncional que podría actuar a nivel nuclear,intervenir en la enfermedad de Chagas y en muchos otrosprocesos aún por investigar.