Enfermedad de Chagas: Establecimiento de una matriz metodológica intercambiable y aplicación de tecnologías post-genómicas para la investigación de sistemas biológicos en Trypanosoma cruzi.

VAZQUEZ, MARTIN; PEREIRA, CA; AGUILAR, CARLOS; SERRA, ESTEBAN

Mendoza

Congreso; VII Congreso Argentino de Protozoología y Enfermedades Parasitarias; 2005

Nuestra red de laboratorios ha establecido una matriz metodologica comun para estudiar complejos proteicos de interaccion de distintas funciones biologicas del parasito Trypanosoma cruzi con dos objetivos: a) uno básico, avanzar sobre la funcionalidad de dichos complejos y b) otro aplicado, encontrar nuevos blancos interesantes para el diseño de drogas. Esta matriz metodologica incluye el clonado sistematico de Marcos Abiertos de lectura (ORFs) de proteinas que hemos determinado que pertenecen a los complejos de interes en el sistema GATEWAY. Este sistema permite transferir los ORFs desde un vector de entrada (el banco) hasta distintos vectores destino por un eficiente y simple sistema de recombinacion. Los vectores destino incluyen expresión en bacterias, en levaduras, sistemas de dos hibridos y expresión en T.cruzi. De esta manera estamos construyendo un banco de ORFs de interes (ORFeoma) intercambiable y compatible entre los laboratorios de la red. Este banco en la actualidad cuenta con xx ORFs correspondientes a los complejos de transcripcion, Splicing, procesamiento de ARN y transferencia de energia. Es nuestro interes expandir esta propuesta y tecnología a otros laboratorios y construir el ORFeoma mas completo de T.cruzi disponible hasta la actualidad para el uso libre de todos los laboratorios que formen parte de la red. La disponibilidad del ORFeoma en Gateway tendría un profundo impacto sobre la genómica estructural y funcional de T.cruzi. Presentamos algunos ejemplos de cómo fue usada hasta ahora esta matriz metodologica comun.