Aplicación de una fosfopentomutasa sobreexpresada en la síntesis de adenosina a partir de ribosa-5-fosfato.

TAVERNA, MARISA; BOUVIER, LEON; PEREIRA, CA; MONTSERRAT, JAVIER; IRIBARREN, ADOLFO

San Pablo

Congreso; III Workshop de Biocatalisis y II Encuentro Regional de Biocatalisis y Biotransformaciones; 2006

La preparación de nucleósidos modificados ha tenido un gran impacto en la química farmacéutica dado que la mayor parte de los agentes antivirales pertenece a esta familia de compuestos. Además, estas moléculas también han tenido una gran repercusión en la química de los ácidos nucleicos, especialmente en la mejora de algunas de sus propiedades químicas. La mayor parte de los métodos de preparación química de los nucleósidos transcurren en múltiples pasos, con reactivos costosos y limitaciones específicas de quimio, regio y estereoselectividad. Altenativamente a los métodos químicos se han desarrollado una serie de preparaciones biotecnológicas que utilizan enzimas aisladas o microorganismos enteros como biocatalizadores. En este trabajo se presentarán los resultados preliminares para la obtención de purinas a partir de furanosas-5-fosfato, utilizando Fosfopentomutasa (FPMasa) y Purínnucleosidofosforilasa (PNPasa) como biocatalizadores. La FPMasa de Escherichia coli se sobreexpresó transformando la cepa de E. Coli BL21, mientras que la PNPasa es de origen comercial. La estrategia de utilización de furanosas-5-fosfato como reactivo de partida es conveniente dado que existen métodos químicos sencillos de fosforilación de la posición 5- de las furanosas, lo cuál es sumamente conveniente en el caso de nucleósidos modificados en el esqueleto furanósico. Se presentarán para el caso modelo de la ribosa-5-fosfato y la adenina como sustrato, las condiciones de T, pH, concentración de sustrato, cofactores y enzimas, optimizadas en función de la maximización de la actividad enzimática y el rendimiento de reacción.