La nistatina como inhibidor del transporte de arginina en Trypanosoma cruzi y su potencial reposicionamiento contra la enfermedad de Chagas.

MACIEL, BELEN; SAYE, MELISA; REIGADA C; RENGIFO, MARCOS; DIGIROLAMO FABIO; MIRANDA MR; PEREIRA CA

CABA

Jornada; XVII Jornadas Científicas del Instituto de Investigaciones Médicas Alfredo Lanari.; 2023

Instituto de Investigaciones Médicas Alfredo Lanari.

La enfermedad de Chagas es causada por el parásitoprotozoario Trypanosoma cruzi y afecta a más de 6 demillones de personas en América Latina. Losmedicamentos usados actualmente son el benznidazol(BZN) y el nifurtimox, pero presentan diversos efectosadversos y son poco efectivos en la etapa crónica, porlo que es necesaria la búsqueda de alternativasterapéuticas.El parásito T. cruzi posee un ciclo de vida complejo,alternando entre el hospedador mamífero y el insectovector. Gran parte de su metabolismo está basado en lautilización de aminoácidos, no sólo como fuentes deenergía y carbono alternativas a la glucosa, sino quetambién los puede transformar en importantesreservorios de energía. Este es el caso de la arginina,que puede ser convertida en fosfoarginina por lareacción reversible arginina+ATPP-arginina+ADP. Eltransportador TcAAP3 es la única permeasa de argininacaracterizada en T. cruzi, y hemos demostrado que alsobre-expresar TcAAP3 se incrementan los niveles dearginina intracelular, provocando un desbalanceenergético que compromete la supervivencia delparasito. Además, el transportador de arginina de T.brucei, ortólogo de TcAAP3, es esencial para lasupervivencia del parasito. El reposicionamiento de fármacos es una forma rápida yeconómica de encontrar nuevos medicamentos.Aprovechando compuestos ya aprobados para otrasenfermedades, este enfoque ofrece un camino másaccesible hacia la identificación de nuevas opcionesterapéuticas. La nistatina (NIS) es un antifúngico, quepuede inhibir al transportador de arginina CAN1 en lalevadura Saccharomyces cerevisiae. En este trabajo seevaluó el potencial de la NIS como inhibidor deltransportador TcAAP3 de T. cruzi y su actividadtripanocida en la cepa CL Brener. En los ensayos detransporte de arginina la NIS presentó unaconcentración inhibitoria del 50% (IC50) sobre laactividad de TcAAP3 de 1,2 μM ± 0,1 μM. En cuanto alefecto tripanocida de la NIS a las 24hs, en epimastigotasse obtuvo una IC50 de crecimiento de 0,21 μM ± 0,05μM, mientras que en tripomastigotas la IC50 desupervivencia fue de 4,9 μM± 0,3 μM. En comparación,las IC50 de BZN fueron de 10,5 μM ± 1,1 μM y 3,6 μM ±0,5 μM para epimastigotas y tripomastigotas,respectivamente, por lo que la NIS presentó una buenaactividad tripanocida. Se planea seguir estudiando elefecto de la NIS sobre el transporte de arginina de T.cruzi mediante el análisis del tipo de inhibición, suespecificidad y su influencia en el metabolismo dearginina. Además, se examinará cómo la NIS afecta laprogresión del ciclo de vida intracelular, mediante elseguimiento de la liberación de tripomastigotas encélulas infectadas y tratadas con NIS. Por último, seestudiará el efecto combinado con el BZN, para evaluarsi existe sinergismo o no.En conclusión, la NIS es un buen agente tripanocida quepuede inhibir el transporte de arginina en T. cruzi, ypresenta un gran potencial para ser reposicionada comouna alternativa terapéutica contra la enfermedad deChagas.