La desoxihipusina sintasa de Trypanosoma cruzi: búsqueda computacional de nuevos inhibidores tripanocidas.

RENGIFO, MARCOS; DIGIROLAMO FABIO; MACIEL, BELEN; SAYE, MELISA; MIRANDA MR; REIGADA C; PEREIRA CA

CABA

Jornada; XVII Jornadas Científicas del Instituto de Investigaciones Médicas Alfredo Lanari.; 2023

Instituto de Investigaciones Médicas Alfredo Lanari.

La desoxihipusina sintasa (DHS, EC 2.5.1.46) cataliza laprimera reacción de la formación de un aminoácidoinusual llamado hipusina, encontrado solo en el factor detraducción 5ª (eIF5A). La hipusina se produce con lamodificación post-traduccional sobre el grupo ξ-aminode un residuo específico de lisina en el eIF5A, paracompletar la activación del factor. Tanto eIF5A como laenzima DHS son esenciales para todos los organismoseucariotas para iniciar la traducción. Mientras enhumanos la DHS es codificada por un único gen quegenera un homotetrámero, en los tripanosomátidos sesabe que existen dos genes que codifican para la DHS,una sub-unidad activa catalíticamente (DHSc) y otracatalíticamente inactiva (DHSi), formando un heterotetrámero. Sin embargo, la formación del mismopotencia la actividad de DHS más de 1000 veces encomparación con la actividad de la DHSc sola, yal menos en Trypanosoma brucei, esta enzima ha sidocatalogada como esencial para la supervivencia delparásito. En Trypanosoma cruzi, el agente etiológico dela enfermedad de Chagas, la DHS se encuentra en dosalelos, uno de 1410pb y otro más corto de 1038pb.Considerando las diferencias entre la enzima humana yla de los tripanosomátidos y su esencialidad, la hipótesisde este trabajo es que se puede identificar inhibidoresde la DHS de T. cruzi (TcDHS) con actividad tripanocida.Para ello, se comenzó con un rastreo virtual por similituden bases de datos que contienen principalmente drogasaprobadas para su uso en humanos, utilizando técnicasbioinformáticas (programa AutoDock Vina) y basadas encaracterísticas estructurales de la enzima (moleculardocking). Dado que la estructura de la TcDHS no seencuentra resuelta experimentalmente, se utilizó comoblanco la DHS de T. brucei, que mostró cerca del 64%de identidad de secuencia. Se comparó la interacción delos sustratos de la DHS, espermidina y NAD+, y de todoslos compuestos de las bases de datos SWEETLEAD yFDA (U.S. Food and Drug Administration), con la subunidadinactiva de la TcDHS. De los 15 compuestosobtenidos, se seleccionaron 3 posibles inhibidores, laDoxazosina, la Cefoperazona y el Tadalafil, cuyasenergías de unión obtenidas se encuentran entre -6.7 y-9.9 Kcal/mol, obteniéndose valores menores o igualesa los calculados para los sustratos NAD+ (-7.2 Kcal/mol)y la espermidina (-3.7 Kcal/mol). Para cada uno de loscompuestos se realizarán las pruebas de inhibición deTcDHS in vitro, y de actividad tripanocida en los distintosestadios de T. cruzi.