Encapsulamiento de nuevos fármacos tripanocidas en liposomas

REIGADA, CHANTAL; DIGIROLAMO FABIO; GALCERAN, FACUNDO; SAYE, MELISA; CARRILLO, CAROLINA; LABADIE, GUILLERMO; PEREIRA, CA; TORRES, PABLO

Buenos Aires

Jornada; III jornadas de jóvenes bionanocientificxs; 2021

Jóvenes bionanocientificxs

La enfermedad de Chagas, causada por el parásito protozoario Trypanosoma cruzi, constituye un grave problema de salud pública en América Latina. Con el objetivo principal de identificar drogas que están aprobadas para su uso en humanos y reposicionadas para su posible aplicación en la enfermedad de Chagas, mediante una estrategia de cribado virtual y ensayos in vitro, recientemente identificamos diferentes fármacos con efecto tripanocida, cuyo mecanismo de acción es a través de la inhibición del transportador de prolina TcAAAP069 o de la permeasa de poliaminas TcPAT12, ambos promisorios blancos terapéuticos contra los tripanosomátidos. Entre dichos fármacos se encuentran el antihistamínico loratadina (LTD), el antibiótico clofazimina (CFZ), y el retinoide isotretinoína (ISO), utilizado para el tratamiento del acné.Este trabajo tiene como objetivo preparar liposomas de ISO, LTD y CFZ, tal que permita la administración de los mismos a células de mamíferos donde proliferan los parásitos de T. cruzi, aumentando la actividad tripanocida y disminuyendo las dosis efectivas de tratamiento y los efectos secundarios al hospedador respecto a los mismos compuestos usados de forma libre. Para ello, se sintetizaron liposomas de fosfatidilcolina (PC) y de colesterol (CHOL), siendo muy usados debido a la estabilidad de las estructuras resultantes. La solución de PC y CHOL se preparó en etanol junto con los fármacos, ISO, LTD o CFZ. Posteriormente, se agregó buffer fosfato salino conteniendo glucosa con el fin de estabilizar los liposomas. Finalmente, la mezcla se sonicó y se filtró para obtener un tamaño más homogéneo de las vesículas. También se prepararon estos mismos liposomas de PC y CHOL pero recubiertos con el biopolímero quitosano, con el objetivo de obtener vesículas liposomales más estables y bioadhesivas. Por último, se determinó la eficiencia de encapsulación de los fármacos en los liposomas por HPLC, obteniéndose valores cercanos a 90%.La siguiente etapa del trabajo consistirá en realizar una caracterización fisicoquímica de las vesículas, mediante el análisis del diámetro medio, la distribución de tamaños, la polidispersión y el potencial zeta. También se evaluará comparativamente la acción tripanocida de los liposomas conteniendo los fármacos respecto al compuesto libre sobre células infectadas con T. cruzi.