INVESTIGADORES
PISTORIO Mariano
convenios, asesorías y/o servicios tecnológicos
Título:
IDENTIFICACIÓN DE ESPECIES MICROBIANAS POR PCR (REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA) (ST3073)
Autor/es:
LAGARES, A.; DEL PAPA, M.F.; PISTORIO, M.; DRAGHI, W. O.; LOZANO, M. J.; TORRES TEJERIZO, G. A.
Fecha inicio:
2017-06-01
Fecha finalización:
2017-07-01
Campo de Aplicación:
Medio terrestre
Descripción:
El servicio de identificación de especies microbianas por PCR es complementario al de identificación por MALDI-TOF MS, permitiendo la detección de regiones genómicas específicas de especie. El servicio incluye el diseño de cebadores específicos a partir de datos genómicos disponibles en bases de datos.MetodologíaLa extracción de DNA se realiza mediante lisis celular por alta temperatura y la adición de suspensión acuosa de resina al 6% Chelex-100 (BIO-RAD). La amplificación de regiones específicas del genoma se lleva a cabo empleando todos los reactivos necesarios para PCR incluidos los oligonucleótidos (primers) previamente diseñados. Las condiciones de ciclado dependen de los primers utilizados. Los productos de PCR son detectados mediante electroforesis en geles de agarosa al 0,8-1,5% utilizando buffer TBE 0,5X con la adición de 1 μg/ml de bromuro de etidio (visualización por transiluminador UV).
