REGULACIÓN DE LA TRANSFERENCIA DEL PLÁSMIDO PLPU83A DE RHIZOBIUM FAVELUKESII LPU83 DESDE DIFERENTES ENTORNOS GENÉTICOS

CASTELLANI, L; LUCHETTI, A.; NILSSON, J; BROM, S.; PISTORIO, M.; TORRES TEJERIZO, G. A.

Buenos Aires

Congreso; XIV Congreso Argentino de Microbiología General; 2019

SAMIGE

Introducción y Objetivos: La transferencia conjugativa (TC) de plásmidos es uno de los mecanismos demayor contribución hacia la diversificación y adaptación bacteriana ya que permite el intercambio deinformación genética entre bacterias de diferentes géneros. Este proceso implica la síntesis de numerosasproteínas, por lo que resulta muy costoso a nivel energético. Debido a esto, la conjugación es un procesoaltamente regulado. En algunos sistemas de rizobios, la regulación está mediada por Quorum Sensing (QS), endonde el regulador TraR activa la conjugación en presencia de una alta concentración de Acyl HomoserinLactonas (AHLs). Las AHLs son sintetizadas por el gen TraI y se acumulan a una alta densidad poblacional. Elplásmido pLPU83a, un plásmido accesorio de Rhizobium favelukesii LPU83, es transferido por conjugación aotras cepas, pero el mecanismo que regula su TC no es claro, ya que necesita TraR pero no AHLs (Castellani etal., 2019). Previamente, hemos identificado 2 genes involucrados en la regulación de la transferencia depLPU83a, pLPU83a0146 y pLPU83a0148, aunque el rol que llevan a cabo es aún desconocido. Con el objetivo dedilucidar dicho rol, y sabiendo que la frecuencia de transferencia de pLPU83a varía según el entorno genómicodel mismo, nos propusimos analizar la transferencia de pLPU83a y sus derivados mutantes en los genes deinterés desde diferentes especies. Para determinar que entornos genómicos evaluar, se buscaron medianteherramientas bioinformáticas en qué otros microorganismos existen genes ortólogos a pLPU83a0146 ypLPU83a0148Materiales y Métodos: Las conjugaciones fueron realizadas empleando la técnica de Simon (1989). Cadaensayo se realizó por triplicado. Las búsquedas bioinformáticas se realizaron mediante la herramienta BLAST-Ptomando como valor de corte para definir homólogos un porcentaje de identidad mayor a 30%.Resultados: Se evaluó la frecuencia de la TC de pLPU83a y sus versiones mutantes pLPU83a0146- ypLPU83a0148- desde Rhizobium etli, Agrobacterium tumefaciens y Ensifer meliloti. La TC de pLPU83a y losmutantes desde E. meliloti se mantiene a similares frecuencias que desde el entorno salvaje. Desde R. etli, lafrecuencia es similar para todas las versiones del plásmido. Desde A. tumefaciens, pLPU83a y pLPU83a0148- nomostraron TC. Llamativamente, pLPU83a0146- evidenció un aumento en la TC.Conclusiones: Los datos presentados en este trabajo confirman la interacción entre elementos regulatorios deun plásmido adquirido recientemente con elementos propios de la cepa aceptora, modificándose elcomportamiento del mismo según los genes que lo rodeen. Se observó que dependiendo del entorno genéticoen el que se encuentre el plásmido, su comportamiento conjugativo puede ser similar al observado en su propio