Estudio de la interacción de los componentes de sistema DesK/R de Bacillus subtilis involucrado en la regulación de la síntesis de ácidos grasos insaturados

MARTÍN, M; MANSILLA, MC; ALBANESI, D; HAIMOVICH, A; CYBULSKI, LE; DE MENDOZA, D

Bahía Blanca, Argentina

Congreso; III Jornadas de Bioquímica y Biología Molecular de Lípidos y Lipoproteínas; 2005

INIBIBB, UNS - CONICET

Se ha propuesto un modelo para el control térmico de la síntesis de ácidos grasos insaturados (AGI) en B. subtilis, llamado “circuito regulatorio Des”. Este circuito está estrictamente regulado por el sistema de dos componentes DesK/R constituido por una quinasa asociada a membrana (DesK) y un regulador transcripcional soluble (DesR). La disminución de la fluidez de la membrana, provocada tanto por una disminución en la temperatura como por un aumento en la proporción de ácidos grasos de mayor punto de fusión, activan el sistema resultando en la activación transcripcional del gen des seguido de la síntesis de la D5-Des y la consecuente desaturación de las cadenas acilos de los fosfolípidos de membrana. Los AGI sintetizados actuarían como moléculas señales negativas para la transcripción de des. Para profundizar acerca de los aspectos bioquímicos y biofísicos de este sistema, se analizó la interacción DesK/R in vitro mediante Far Western Blots. Se demostró que DesR purificado es capaz de interaccionar con el dominio citoplasmático de DesK (DesKC) fijado a membrana. Asimismo se realizaron análisis in vivo de la localización de DesK/R y D5-Des mediante microscopia de fluorescencia. Se encontró que una proteína de 66 kDa, cuyos niveles se ven aumentados en una mutante YvfT/U, es reconocida por los anticuerpos inmunopurificados anti-DesR y sería capaz de interaccionar con DesKC. En base a estos resultados se plantea la identificación de la proteína de 66kDa como el análisis in vivo de la interacción DesK/R y DesK/D5-Des.