INVESTIGADORES
ARGAÑARAZ Martin Eduardo
capítulos de libros
Título:
Amplificación de ácidos nucleicos
Autor/es:
MARTIN E. ARGAÑARAZ; MARÍA C. ESTEVÉZ
Libro:
Conceptos Teóricos y Prácticos Para El Estudio Células y Biomoléculas
Editorial:
Universidad Nacional de Tucumán
Referencias:
Lugar: San Miguel de Tucumán; Año: 2008; p. 155 - 180
Resumen:
INTRODUCCIÓN La replicación del ADN fue posible en 1958 cuando Kornberg descubrió la ADN polimerasa; durante muchos años la principal aplicación fue la secuenciación de ADN por el método de Sanger. En 1986 Mullis y col. describieron un proceso reiterativo que permitía incrementar exponencialmente el número de ácidos nucleicos (amplificación). Las técnicas de amplificación pueden clasificarse de diferentes maneras: Amplificación de la secuencia diana · PCR (Reacción en cadena de la polimerasa)PCR (Reacción en cadena de la polimerasa) · NASBA (Nucleic acid sequence based amplification)NASBA (Nucleic acid sequence based amplification) · SDA (Strand displacement amplification)SDA (Strand displacement amplification) · TMA (transcription-mediated amplification) Amplificación de la sonda Amplificación de la sonda Amplificación de la sonda TMA (transcription-mediated amplification) Amplificación de la sonda · Qb (replicase amplification)Qb (replicase amplification) · LCR (Ligase chain reaction)LCR (Ligase chain reaction) REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA (PCR) La reacción en cadena de la polimerasa o PCR (Polymerase Chain Reaction) es una técnica de biología molecular que permite amplificar enormemente el número de copias de una secuencia específica de ADN, vía replicación enzimática y sin el uso de organismos vivos. La PCR es una técnica in vitro lo que facilita su empleo en una amplia variedad de muestras y su modificación para realizar manipulaciones genéticas. La técnica fue desarrollada por Kary Mullis en 1985 para la Corporación Cetus; quien recibió el premio Nóbel en química por su descubrimiento. La PCR permite disponer, en forma rápida y eficaz, de cantidades suficientes de una determinada secuencia de DNA (aproximadamente un millón de copias en menos de una hora) para su posterior estudio molecular. La aplicación de la PCR a distintas áreas de la medicina y la biología ha crecido considerablemente en los últimos años, simplificando y magnificando las posibilidades diagnósticas de la tecnología del ADN recombinante (Figura 1). La nueva tecnología permite el diagnóstico preciso de la patología genética hereditaria o adquirida, y facilita la investigación sobre los defectos moleculares todavía no definidos. La aplicación de la PCR a la medicina forense y legal supone, sin duda, entrar en una nueva era para esta disciplina. Finalmente, la PCR permite la detección de una amplia variedad de patógenos responsables de enfermedades infecciosas. La revolución que la PCR ha originado en el campo de la investigación genética y molecular es comparable a la producida por el descubrimiento de las enzimas de restricción o de los polimorfismos del ADN. facilita su empleo en una amplia variedad de muestras y su modificación para realizar manipulaciones genéticas. La técnica fue desarrollada por Kary Mullis en 1985 para la Corporación Cetus; quien recibió el premio Nóbel en química por su descubrimiento. La PCR permite disponer, en forma rápida y eficaz, de cantidades suficientes de una determinada secuencia de DNA (aproximadamente un millón de copias en menos de una hora) para su posterior estudio molecular. La aplicación de la PCR a distintas áreas de la medicina y la biología ha crecido considerablemente en los últimos años, simplificando y magnificando las posibilidades diagnósticas de la tecnología del ADN recombinante (Figura 1). La nueva tecnología permite el diagnóstico preciso de la patología genética hereditaria o adquirida, y facilita la investigación sobre los defectos moleculares todavía no definidos. La aplicación de la PCR a la medicina forense y legal supone, sin duda, entrar en una nueva era para esta disciplina. Finalmente, la PCR permite la detección de una amplia variedad de patógenos responsables de enfermedades infecciosas. La revolución que la PCR ha originado en el campo de la investigación genética y molecular es comparable a la producida por el descubrimiento de las enzimas de restricción o de los polimorfismos del ADN. facilita su empleo en una amplia variedad de muestras y su modificación para realizar manipulaciones genéticas. La técnica fue desarrollada por Kary Mullis en 1985 para la Corporación Cetus; quien recibió el premio Nóbel en química por su descubrimiento. La PCR permite disponer, en forma rápida y eficaz, de cantidades suficientes de una determinada secuencia de DNA (aproximadamente un millón de copias en menos de una hora) para su posterior estudio molecular. La aplicación de la PCR a distintas áreas de la medicina y la biología ha crecido considerablemente en los últimos años, simplificando y magnificando las posibilidades diagnósticas de la tecnología del ADN recombinante (Figura 1). La nueva tecnología permite el diagnóstico preciso de la patología genética hereditaria o adquirida, y facilita la investigación sobre los defectos moleculares todavía no definidos. La aplicación de la PCR a la medicina forense y legal supone, sin duda, entrar en una nueva era para esta disciplina. Finalmente, la PCR permite la detección de una amplia variedad de patógenos responsables de enfermedades infecciosas. La revolución que la PCR ha originado en el campo de la investigación genética y molecular es comparable a la producida por el descubrimiento de las enzimas de restricción o de los polimorfismos del ADN. in vitro lo que facilita su empleo en una amplia variedad de muestras y su modificación para realizar manipulaciones genéticas. La técnica fue desarrollada por Kary Mullis en 1985 para la Corporación Cetus; quien recibió el premio Nóbel en química por su descubrimiento. La PCR permite disponer, en forma rápida y eficaz, de cantidades suficientes de una determinada secuencia de DNA (aproximadamente un millón de copias en menos de una hora) para su posterior estudio molecular. La aplicación de la PCR a distintas áreas de la medicina y la biología ha crecido considerablemente en los últimos años, simplificando y magnificando las posibilidades diagnósticas de la tecnología del ADN recombinante (Figura 1). La nueva tecnología permite el diagnóstico preciso de la patología genética hereditaria o adquirida, y facilita la investigación sobre los defectos moleculares todavía no definidos. La aplicación de la PCR a la medicina forense y legal supone, sin duda, entrar en una nueva era para esta disciplina. Finalmente, la PCR permite la detección de una amplia variedad de patógenos responsables de enfermedades infecciosas. La revolución que la PCR ha originado en el campo de la investigación genética y molecular es comparable a la producida por el descubrimiento de las enzimas de restricción o de los polimorfismos del ADN.