EFECTO DEL PH EN LA RELACIÓN ESTRUCTURA-FUNCIÓN DE LA PROTEÍNA INMUNOMODULADORA DE UNIÓN A GLICANOS GALECTINA-1

DI LELLA, SANTIAGO; MÉNDEZ-HUERGO, SANTIAGO; CARAMELO, JULIO JAVIER; GALLO, MARIANA; ESTRIN, DARÍO ARIEL; RABINOVICH, GABRIEL ADRIÁN

Mar del Plata

Congreso; LX Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología - LVII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2012

Sociedad Argentina de Investigación Clínica - Sociedad Argentina de Inmunología

Galectina-1 (Gal1) es una lectina endógena capaz de reconocer glicoconjugados en una amplia variedad de tejidos. Se le ha asignado un papel fundamental en la regulación homeostática de la respuesta inmune. Su potencial terapéutico inmunosupresor ha sido demostrado en modelos de autoinmunidad y cáncer. Los estudios funcionales de Gal1 han sido desarrollados a un pH fisiológico de 7,4. Sin embargo, los microambientes en los cuales se desarrollan respuestas inmunes presentan características físico-químicas particulares. Entre ellos, el pH es un factor crítico, ya que los ambientes inflamatorios pueden presentar una acidez considerable (pH 5, acidosis extrema). El objetivo de este estudio es comprender  el impacto de variaciones en el pH sobre la actividad inmunorreguladora de Gal1, a través de un abordaje multidisciplinario desde ensayos experimentales en células hasta estudios biofísicos estructurales utilizando técnicas de modelado. Los resultados evidenciaron una asociación entre la actividad proapoptótica de Gal1 y la acidez del medio extracelular en ensayos en células mononucleares de sangre periférica humana (44%, 26%, 9% y 5% a pH 7,5; 6,5; 6 y 5, respectivamente). Esta asociación se verificó en ensayos de unión de Gal1 a células Jurkat por citometría de flujo (p<0,05) y en ensayos por fluorescencia, utilizando como ligando a la lactosa (567µM vs 2664µM a pH 7 y 5,5, respectivamente). Por último, y utilizando Resonancia Magnética Nuclear y simulación computacional, analizamos las bases  estructurales de este fenómeno biológico, evaluando la protonación de determinados residuos histidinas como responsables de dicha modulación (pKaprotonación 5,7 y 6,3, para histidinas 44 y 52, respectivamente). En conjunto, los resultados expuestos revelan la influencia de la acidez del microentorno en la actividad inmunomoduladora de Gal1 con críticas implicancias en la regulación de la función de esta proteína en microambientes inflamatorios y tumorales.