INVESTIGADORES
BERTOLINO Franco Adrian
congresos y reuniones científicas
Título:
Determinación del biomarcador de cáncer epitelial usando un inmunosensor microfluídico basado en nanopartículas de plata como bioplataforma
Autor/es:
MARTÍN FERNÁNDEZ BALDO; GASTÓN FERNÁNDEZ; MARÍA ISABEL SANZ FERRAMOLA; FRANCO A. BERTOLINO; GERMÁN MESSINA; JULIO RABA
Lugar:
La Plata
Reunión:
Congreso; 8° Congreso Argentino de Química Analítica; 2015
Institución organizadora:
AAQA
Resumen:
EpCAM (molécula de adhesión de las células epiteliales) es una proteína de superficie celular que se sobreexpresa en algunos cánceres de origen epitelial como lo son el de pulmón, colorrectal, mama, próstata y el de origen hepático [1, 2]. En el presente trabajo presentamos un inmunosensor microfluido aplicado a la determinación del biomarcador de cáncer epitelial EpCAM [3]. Éste se basa en el uso de nanopartículas de plata (AgNPs) sintetizadas recubiertas por quitosano (Cts). Las AgNPs-Cts fueron covalentemente unidas al canal central (CC) del inmunosensor microfluido mediante un proceso de salinización con 3-aminopropil trietoxisilano (3-APTES) y empleadas como plataforma para la inmovilización de anticuerpos monoclonales anti-EpCAM, quienes reaccionarán específicamente con el biomarcador EpCAM presente en muestras de sangre perisférica. Posteriormente, la cantidad de EpCAM que reaccionó fue cuantificado por un segundo anticuerpo anti-EpCAM marcado con la enzima peroxidasa (HRP), la que, en presencia de peróxido de hidrógeno, cataliza la oxidación de 4-ter-butil-catecol a 4-terbutil-ortoquinona. Esta última es reducida electroquímicamente en la superficie de un electrodo de oro depositado en el CC a -0,10 V. La corriente medida es directamente proporcional a la concentración de EpCAM presente en la muestra del paciente. Por otra parte, la estructura y morfología de las AgNPs-Cts sintetizadas fueron caracterizadas por espectrofotometría UV-visible, microscopía electrónica de barrido, espectrometría de energía dispersiva y fluorescencia de rayos X. Los límites de detección para el método propuesto y un ELISA comercial que se utilizó para validar nuestro desarrollo fueron de 2,7 y 13,9 pg mL-1, respectivamente y los coeficientes de variación para los ensayos intra e inter día fueron menores que 6,37%.