DETERMINACION DE ETINILESTRADIOL EN MUESTRAS DE AGUA UTILIZANDO UN INMUNOSENSOR MAGNETICO

NOELIA A. MARTÍNEZ; FRANCO A. BERTOLINO; JULIO RABA; GERMÁN A. MESSINA

Bahía Blanca

Congreso; V Congreso Argentino de Química Analítica; 2009

Universidad Nacional del Sur

Etinilestradiol (EE2) es un estrógeno sintético derivado del estradiol. Su uso más frecuente se da en combinación con gestágenos para la preparación de anticonceptivos orales. EE2 es considerado un interruptor endócrino y se lo encuentra en el ambiente acuático como resultado de la excresión humana y animal, ocasionando efectos adversos en organismos que habitan dicho ambiente [1-4]. Nuestro objetivo fue desarrollar un sistema microfluido en cuyo canal central se incorporaron nanopartículas magnéticas modificadas con aticuerpos anti EE2 [5]. Dichas partículas fueron retenidas en una posición fija del canal, empleando un imán externo removible. Este dispositivo fue acoplado a un sistema de inyección en flujo y detección electroquímica para una sensible cuantificación de EE2 en muestras de agua. La determinación de EE2 en dichas muestras fue llevada a cabo utilizando un inmuoensayo competitivo. El EE2 presente en la muestra compitió inmunológicamente con EE2 unido a peroxidasa (HRP) por los anticuerpos anti-EE2  inmovilizados sobre las partículas paramagnéticas. HRP en presencia de peróxido de hidrógeno (H2O2) cataliza la oxidación de catecol (Q). La corriente de reducción generada  por la transformación de P a Q fue detectada sobre una película de oro que actúa como electrodo de trabajo a 0.0 V. La respuesta obtenida a partir del producto de la reacción enzimática es directamente proporcional a la actividad enzimática e inversamente proporcional a la cantidad de EE2 presente en la muestra de agua. Los límites de detección calculados para la detección electroquímica y el procedimiento de ELISA fueron de 0.09 and 0.32 ng L-1 EE2 respectivamente. Los coeficientes de variación de los ensayos intra e interdia fueron menores al 6%. Los resultados obtenidos demuestran que nuestro inmunosensor magnético puede ser utilizado para una rápida y sensible cuantificación de EE2 en muestras de agua.     REFERENCIAS [1] Larsson, D.G.J., Adolfsson-Erici, M., Parkkonen, J., Pettersson, M., Berg, P.-E., Olsson, A.H., Forlin, L., 1999. Aquat. Toxicol. 45, 91-97. [2] Tabak, H.H., Bunch, R.L., 1970. Dev. Ind. Microbiol. 11, 367-376. [3] Daughton, C.G., 2004. Environ. Impact. Assess. Rev. 24, 711-732. [4] Lopez de Alda, M.J., Barcelo, D., Fresen. J., 2001. Anal.Chem. 371, 437 –447. [5] Peterson, D.S., 2005. Lab. Chip 5 (2), 132–139.